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作者:惠倩倩;靖媛;欧阳思洁;游世晶;童伯瑛;
单位:福建中医药大学针灸推拿学院;
摘要:目的 探讨艾灸关元穴延缓皮肤光老化衰老的潜在作用机制。方法 将32只雄性Wistar大鼠随机分为空白组、模型组、维生素E组和艾灸组,每组8只。除空白组外,其余各组大鼠进行紫外线光照背部皮肤建立皮肤光老化模型。造模结束1周后,艾灸组大鼠艾灸“关元”穴,每天1次,每周灸5天;维生素E组大鼠给予维生素E 25 mg/(kg·d)灌胃,每天1次,每周5天;空白组、模型组和艾灸组大鼠给予等量的生理盐水灌胃;各组干预连续7周。7周后取大鼠背部皮肤组织,检测皮肤组织的含水量;采用HE染色观察皮肤组织学形态;ELISA法检测皮肤组织胶原蛋白Ⅰ(CollagenⅠ)、胶原蛋白Ⅲ(CollagenⅢ)含量;检测皮肤组织中丙二醛(MDA)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-px)、超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢(H2O2)和过氧化氢酶(CAT)活性;Western Blot法检测皮肤组织中自噬相关蛋白微管相关蛋白1A/1B轻链3(LC3)、多聚泛素结合蛋白(p62)和自噬特异性基因(Beclin-1)蛋白水平;qRT-PCR法检测皮肤组织中LC3、p62、Beclin-1 mRNA表达;透射电镜观察皮肤自噬小体的形成情况。结果 HE染色结果显示,空白组大鼠的皮肤表皮结构规整,厚度均匀;模型组大鼠的皮肤表皮厚薄不一;艾灸组大鼠表皮层规则且平整,厚度较为均匀,真皮层排列紧密;维生素E组大鼠皮肤表皮层较模型组变厚。与空白组比较,模型组大鼠皮肤组织含水量及皮肤组织中CollagenⅠ、CollagenⅢ含量均降低,皮肤组织SOD、CAT和GSH-Px活性均降低,H2O2及MDA活性升高,p62蛋白水平及其mRNA表达升高,LC3和Beclin-1蛋白水平及其mRNA表达降低(P<0.05或P<0.01)。与模型组比较,艾灸组上述各指标均有所改善(P<0.05或P<0.01),维生素E组皮肤组织中CollagenⅠ和CollagenⅢ含量差异无统计学意义(P>0.05)。透射电镜结果显示,与空白组比较,模型组皮肤细胞整体萎缩,线粒体出现大量空泡化,细胞结构降解;艾灸组大鼠皮肤组织出现新月状或杯状的自噬小体,单位面积内可见自噬小体数量明显增加,而维生素E组改善不如艾灸组改善明显。结论 艾灸“关元”穴对光老化皮肤的改善作用可能与其调节氧化应激紊乱、调控细胞自噬,促进胶原蛋白合成有关,从而延缓皮肤衰老的进程。
关键词:光老化;;皮肤老化;;艾灸;;关元穴;;自噬;;氧化应激;;胶原蛋白
基金资助:国家自然科学基金(82004438);; 福建省自然科学基金(2023J01869)