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作者：李星颖;谢梓民;原耀贤;孙铭澮;江文康;赵明明;何诗;何静;赖健仪;白银山;陈胜锋;陈志胜;马骏;王丙云;
单位：佛山大学生命科学与工程学院;
摘要：为了提高猫传染性腹膜炎（FIP）的临床检出率，本试验根据猫传染性腹膜炎病毒（FIPV)M基因设计特异性引物，将扩增的目的基因连接到p MD19-T载体上，获得重组质粒并作为标准阳性模板，建立针对FIPV的SYBR Green实时荧光定量PCR(q PCR）检测方法，并对其特异性、敏感性、重复性和临床检出率进行验证。结果显示，本方法梯度稀释的标准品与Ct值呈良好的线性关系，R~2=0.999 9，扩增效率为92.4%；与其他猫常见病毒未发生交叉反应；最低检测限为3.48×10~2 copies/μL，敏感性是普通PCR检测方法的100倍；该方法重复性好，批内和批间变异系数均小于2.4%；应用该方法对临床阳性样本的检出率为100%，阴性样本检出率为0。结果表明，本试验建立的SYBR Green q PCR检测方法特异性强、敏感性高、重复性好、临床检测效果佳，可用于FIPV的临床诊断。
关键词：猫传染性腹膜炎病毒;;M基因;;SYBR Green;;实时荧光定量PCR(qPCR)
基金资助：广东省普通高校动物干细胞工程技术研究中心项目（2021GCZX006）
