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作者：元娜;邵明珠;吕凤霞;窦丽娜;李向清;赵宝凯;董世山;
单位：河北农业大学动物医学院;北京大伟嘉生物技术股份有限公司;河南牧翔动物药业有限公司;
摘要：为了分析猪繁殖与呼吸综合征病毒（PRRSV）遗传变异特性，本试验对来自山西省某猪场疑似感染PRRSV的母猪血清和仔猪肺脏组织样品进行PRRSV实时荧光定量逆转录PCR(qRT-PCR)检测，阳性肺脏组织样品研磨液接种于猪肺泡巨噬细胞（PAMs），将出现细胞病变的PAMs进行有限稀释法纯化后用间接免疫荧光（IFA）鉴定，利用逆转录PCR(RT-PCR)分段扩增分离毒株全基因组序列，并用分子生物学软件进行开放阅读框5(ORF5)基因和全基因组的同源性和遗传进化分析、非结构蛋白2(Nsp2)氨基酸特征及全基因组序列的重组分析。结果显示，qRT-PCR检测样品总阳性率为80%(16/20)，从PRRSV阳性仔猪肺脏组织中分离获得1株PRRSV，命名为SXZY202301；分离毒株基因组全长15 021 bp，与NADC30毒株的核苷酸同源性达到90.4%，在遗传进化树中处于同一分支，属于Sublineage 1.8;ORF5基因与IA/2014/NADC34毒株的ORF5基因高度相似，同源性达到了95.1%，在遗传进化树中处于同一分支，属于Sublineage 1.5；分离毒株与类NADC30毒株Nsp2氨基酸序列具有相同的131个氨基酸缺失的典型特征；重组分析结果显示，SXZY202301存在6个重组位点，是以类NADC30毒株为主要亲本，以JXA1毒株和类NADC34毒株为次要亲本的多毒株重组类毒株。本试验为进一步研究PRRSV的重组和演化提供参考。
关键词：猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV);;分离鉴定;;测序分析;;遗传进化;;重组
