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作者：邱丽霞;林秀;曹忻;杨华;杨永林;余乾;张文喆;
单位：西北民族大学生命科学与工程学院;新疆农垦科学院,省部共建绵羊遗传改良与健康养殖国家重点实验室;西北民族大学实验教学部;
摘要：为阐明绵羊谷胱甘肽S转移酶α2(Glutathione S-transferase alpha 2,GSTA2)基因功能，利用牛GSTA2基因序列设计引物，提取绵羊皮肤组织总RNA，应用RT-PCR、基因克隆、生物信息学对GSTA2基因进行研究，构建真核表达载体，转染绵羊皮肤成纤维细胞，应用qPCR技术检测GSTA2基因的表达。结果表明，克隆到绵羊GSTA2基因672 bp编码区序列（GenBank登录号：OR440604.1），编码223个氨基酸，分子量为25.39 ku。氨基酸比对和系统进化树分析表明，绵羊与牛的GSTA2相似度最高，达87.39%。GSTA2的二级结构以α-螺旋和无规则卷曲为主。构建的真核表达载体pcDNA3.1-GSTA2转染绵羊皮肤成纤维细胞后，GSTA2基因表达量极显著上调（P <0.001）。说明成功克隆了绵羊新基因GSTA2的CDS序列，并成功构建了其真核表达载体。
关键词：绵羊;;GSTA2基因;;克隆;;生物信息学;;真核表达载体
基金资助：国家自然科学基金（32360818）;; 新疆维吾尔自治区“天山英才”培养计划;; 兵团农业GG项目;; 兰州市科技局项目（2019-1-42）;; 自治区肉毛兼用绒毛用羊品种选育提升计划（2023XJRMY-03）;; 兵团农业科技创新工程专项（NCG202211）;; 中央高校项目（31920220026）
