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作者：王妍;凤梓涵;王亚茹;李世青;陈鑫;王景林;袁媛;
单位：赣南医科大学公共卫生与健康管理学院;病原微生物生物安全全国重点实验室;中国人民解放军第96110部队医院疾病预防控制科;海南省药品监督管理局,海南省药品查验中心;
摘要：目的 评价创伤弧菌分泌型外毒素-溶血素(VVH)是否能激活血液重要免疫细胞-血小板，探索VVH活化血小板可能的分子机制。方法 首先通过转录组学和免疫组织化学染色分析创伤弧菌感染后是否引起小鼠血小板活化，再通过流式细胞术鉴定VVH是否为血小板活化的主要刺激元，然后制备天然表达的VVH毒素，通过流式细胞术和Western blot法评价胞外和胞内钙离子信号抑制剂对VVH活化血小板的影响；最后通过体内实验分析VVH在创伤弧菌感染早期的免疫激活作用。结果VVH是创伤弧菌培养上清中引起血小板活化的主要刺激元。天然VVH可诱导血小板表面P-选择素(CD62P)表达量的增加、血小板-中性粒细胞复合体(PNC)的形成、血小板微囊泡的释放。其激活机制可能与VVH成孔依赖性的Ca~(2+)-钙调素(CaM)-肌球蛋白轻链激酶(MLCK)信号通路有关，从而引起血小板α-颗粒物的释放和血小板的级联激活。在创伤弧菌灌胃感染的酒精性肝病(ALD)小鼠模型中，VVH与血小板的活化密切相关。结论 本研究表明，在创伤弧菌感染早期，VVH是机体内激活血小板的重要分子，其诱导机体血小板活化可能与致病过程有关。
关键词：创伤弧菌溶血素(VVH);;血小板;;P-选择素(CD62P);;酒精性肝病(ALD)
