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作者：夏悦婷;余庆;黄琳;黄静;覃向谋;赵明明;韦冬冬;王浩;凌飞;常彦磊;许伟江;刘明珠;李鹏飞;
单位：广西科学院广西海洋科学院/广西水产生物技术与现代生态养殖重点实验室/广西渔业重大疫病防控与高效健康养殖产业技术工程研究中心;上海海洋大学国家水生动物病原库/农业农村部淡水水产种质资源重点实验室;西北农林科技大学动物科技学院;广州双螺旋基因技术有限公司;广东海洋大学;北部湾大学海洋学院/广西北部湾海洋生物多样性养护重点实验室;
摘要：【目的】开发一种基于核酸适体功能化纳米磁珠的石斑鱼虹彩病毒（Singapore grouper iridovirus,SGIV）快速检测新方法，以解决传统病毒检测技术操作繁琐、耗时长、设备依赖性强等问题。【方法】将前期筛选获得的可特异性识别SGIV的核酸适配体进行优化及修饰，获得核酸适配体Q5c，并将其与纳米磁珠进行偶联，构建核酸适配体偶联磁性纳米探针（Aptamer magnetic nanobeads,Q5c-MNPs）。利用多病原交叉实验验证Q5c-MNPs对SGIV感染细胞的特异性靶向识别，采用流式细胞术、荧光定量PCR等技术系统评价探针的稳定性、灵敏度等关键性能指标。【结果】Q5c-MNPs可特异性识别SGIV感染的细胞，并在500 nmol/L浓度下孵育时间短至1 min，在4～37℃温度范围内检测性能稳定。检测灵敏度达1×10~3个/mL，与RT-qPCR检测灵敏度相当。而本方法检测周期仅需2h，较常规分子检测方法效率显著提升。【结论】成功构建Q5c-MNPs检测体系，该体系兼具高特异性、高灵敏度和快速响应等优势，为开发水产病害现场快速检测试剂盒奠定重要技术基础。
关键词：石斑鱼虹彩病毒;;核酸适配体Q5c;;纳米磁珠;;快速检测
基金资助：广西自然科学基金（AD23026331,2022JJA130281,2024GXNSFFA010017）;; 广西科技项目（GUIKEFA[2024]102-2）;; 国家现代农业产业技术体系广西创新团队建设项目（nycytxgxcxtd-2021-08-02）;; 来宾科技计划（Laikechan 241519）
