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作者：刘佳悦;刘天奇;张会;樊俊博;马境辰;李杰;
单位：东北农业大学生命科学学院;
摘要：为探究融合蛋白和密码子优化策略对凝乳酶表达的影响，试验采用对重组菌株进行蛋白、酶活力检测方法，总结出提高蛋白质产量的有效策略。结果表明：以黑曲霉高分泌蛋白GlaA、XynB、AmyA、EglA、FaeA、Amy15作为载体蛋白，重组牛凝乳酶活力分别达到5 140.75、3 725.94、2 088.97、1 202.41、444.19、307.69 SU·mL~(-1)。使用密码子优化策略，融合Amy15、XynB、GlaA载体蛋白的重组牛凝乳酶活力分别为514.51、4151.44、5 072.21 SU·mL~(-1)。分析重组牛凝乳酶酶学性质，最适反应温度为70℃、最适pH为6.0，添加Fe~(3+)可显著提高酶活力。试验构建出高效表达凝乳酶的黑曲霉重组菌株，为异源低表达蛋白在黑曲霉中的高效表达提供新思路。
关键词：黑曲霉;;牛凝乳酶;;优化表达策略;;高效分泌表达
基金资助：黑龙江省自然科学基金项目（ZL2024C002）
