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作者：洪佳乐;职毓杰;吴成甲;张美娜;郭国军;杨振江;董鹏生;黄小城;于光晴;李明;武国兆;刘变枝;
单位：河南农业大学动物科技学院;河南牧业经济学院;河南省水产技术推广站;
摘要：为探究鲤RNF181(ring finger protein181,RNF181)的生物学功能，本实验克隆并鉴定了鲤RNF181基因编码区(coding sequence, CDS)全长，使用生物信息学软件对其蛋白性质和功能进行分析。并通过RT-qPCR检测其在各组织和早期发育阶段的基因表达。同时，利用鲤春病毒血症病毒(spring viremia of carp virus, SVCV)和Poly(I:C)[polyriboinosinic-polyribocytidylic acid, Poly(I:C)]进行在体和离体刺激实验，研究其对SVCV和Poly(I:C)刺激的响应规律。结果显示，鲤RNF181基因CDS区序列全长471 bp,编码157个氨基酸，其氨基酸序列与鱼类遗传距离较近，与哺乳动物则相对较远。该蛋白分子质量为18.09 kDa,等电点为4.86,主要定位于细胞核和细胞质中，具典型RING-H2-RNF181结构域。二级结构和三级结构显示其以无规卷曲和α螺旋为主。底物蛋白分析结果表明RNF181与NUGGC.1、TRIM36等相互作用的置信度高。组织表达谱分析表明，RNF181的mRNA表达水平在鳃中表达最高，肝脏中最低。早期发育阶段，在卵裂期、囊胚期和原肠胚期表达最高，孵化出膜期和孵化出膜后1 d表达水平最低。SVCV感染和Poly(I:C)刺激，RNF181的mRNA表达水平在脾脏、头肾、心脏和肌肉中显著上调。离体实验中，无论是SVCV感染还是Poly(I:C)刺激，RNF181的mRNA表达水平均呈现先下降后上升的趋势，而且鲤RNF181能够响应病毒的侵染，且这种响应受刺激时间和刺激剂量影响。上述结果提示，鲤RNF181可能在鲤抗病毒免疫中发挥重要调控作用。
关键词：RNF181基因;;鲤(Cyprinus carpio);;表达模式;;病毒刺激;;鲤春病毒血症病毒;;Poly(I:C)
基金资助：河南省自然科学基金(252300420186);; 河南省科技攻关(252102110056);; 河南省现代农业产业技术体系(HARS-22-16-T)
