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作者：甘辉群;王永娟;吴双;傅宏庆;谭菊;刘明生;
单位：江苏农牧科技职业学院;
摘要：旨在获得高表达的鸭短喙侏儒综合征病毒VP2抗原蛋白。本试验通过对接毒与表达工艺中pH值、Sf9细胞密度、接毒量、收获时间、搅拌转速和溶氧值等参数进行优化，考察VP2重组杆状病毒的增殖情况，收获病毒液，测定病毒含量变化；同时，对培养物进行VP2蛋白SDS-PAGE和Western blot分析，并采用SDS-PAGE灰度扫描测定蛋白含量。结果：在pH值维持6.8～7.2,接毒密度为1.0×10~6～2.0×10~6个/mL,感染复数(MOI)值为0.01～0.1,收获时间为接种后5～7 d,转速100～140 r/min,溶氧度控制在40%～80%时，重组杆状病毒生长较好，含量较高，达10~(7.7)～10~(8.5) TCID_(50)/mL;均出现约65 kDa目的条带，蛋白表达量基本一致，达57μg/mL以上。根据优化的工艺参数在5 L反应器进行5批抗原生产验证，VP2蛋白表达量达58～63μg/mL,蛋白生产稳定，表达量高。
关键词：鸭短喙侏儒综合征;;重组杆状病毒;;Sf9细胞;;接毒工艺;;表达生产工艺
基金资助：江苏农牧科技职业学院畜禽产业核心技术创新项目(NSF2021ZR02);; 江苏省高等学校自然科学研究重大项目(21KJA230001)
