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作者：赵章;陈竹香;
单位：江汉大学附属湖北省第三人民医院耳鼻咽喉头颈外科;
摘要：目的 探究线粒体钙单向转运蛋白(mitochondrial calcium uniporter, MCU)在HEI-OC1细胞氧化应激损伤中的作用。方法 使用H_2O_2诱导建立类毛细胞HEI-OC1细胞氧化应激损伤模型，分为正常对照组(正常培养)、H_2O_2组(用含0.5 mM H_2O_2培养基处理24 h)、H_2O_2+Ru360(MCU抑制剂)组(用5μM Ru360预处理1 h,然后在含0.5 mM H_2O_2的培养基中继续培养24 h),通过CCK-8法检测各组细胞活力，应用流式细胞学检测氧化应激状态，应用JC-1探针和Rhod-2/AM探针分别观察线粒体膜电位(mitochondrial membrane potential, MMP)和线粒体Ca~(2+)水平，并用Western blot检测MCU、GTP酶动力相关蛋白(Drp1)及线粒体融合素(mitofusion, MFN1、MFN2)蛋白表达水平。结果 与正常对照组比较，H_2O_2组HEI-OC1细胞出现氧化应激损伤，细胞活力明显下降，活性氧(reactive oxygen species, ROS)蓄积，MMP丢失，伴随着线粒体Ca~(2+)超载，MCU蛋白表达升高，Drp1线粒体易位，MFN1及MFN2表达降低；H_2O_2+Ru360组细胞MCU高表达被抑制，细胞活力升高，ROS水平降低，线粒体Ca~(2+)减少，线粒体相关稳态恢复，与H_2O_2组相比，差异均有统计学意义(P<0.05)。结论 MCU参与HEI-OC1细胞氧化应激损伤，抑制MCU可通过改善线粒体动力学相关稳态缓解细胞损伤。
关键词：线粒体钙单向转运蛋白;;耳蜗HEI-OC1细胞;;氧化应激;;线粒体动力学
基金资助：湖北省卫生健康委员会科研项目(WJ2023F036)
