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作者：姜欣玉;董丹;黄浩;王鹏;陈秋月;吴向未;陈雪玲;
单位：石河子大学医学院;
摘要：目的 探讨蟾毒灵(Bufalin)对转化生长因子β(Transforming growth factor-β,TGF-β)介导的巨噬细胞极化表型转换的调控作用及其对巨噬细胞-肝星状细胞(Hepatic stellate cells, HSCs)交互的影响。方法 采用佛波酯(PMA,50 ng·mL~(-1))将人单核细胞白血病细胞(Tohoku hospital pediatrics-1,THP-1)诱导分化为M0型巨噬细胞后，随机分为5组：1)空白对照组；2)TGF-β单处理组(10 ng·mL~(-1));3～5.TGF-β+低、中、高剂量蟾毒灵处理组(4、8、16 nmol·L~(-1))。通过CCK-8法检测THP-1细胞活性；western blot和qRT-PCR分析M1/M2极化标志物(CD86、IL-1β、iNOS;CD206、IL-10、Arg-1)的表达变化。收集各组巨噬细胞上清，并将其作为条件培养基(CM)与人肝星状细胞(LX-2)共培养24 h,进一步通过western blot、qRT-PCR、EdU和CCK-8实验评估LX-2细胞活化标志物(α-SMA、COL1A1)及增殖情况。结果 TGF-β显著诱导巨噬细胞向M2表型极化(CD206、IL-10、Arg-1表达上调，CD86、IL-1β、iNOS表达下调，P<0.05),而蟾毒灵能够逆转此效应(P<0.05)。此外，TGF-β组巨噬细胞CM显著促进LX-2细胞活化和增殖(P<0.05),而蟾毒灵处理组CM可抑制上述效应(P<0.05)。结论 蟾毒灵能够逆转TGF-β诱导的M2型巨噬细胞极化并抑制其介导的肝星状细胞增殖和活化。
关键词：肝纤维化;;蟾毒灵;;巨噬细胞;;肝星状细胞
基金资助：新疆生产建设兵团指导性计划项目(2022ZD041);; 新疆维吾尔自治区天山英才科技创新团队项目：中亚地区高发疾病防治应用研究创新团队项目(2023TSYCTD0020)
