来源：期刊VIP网 时间：
作者：郝健亨;常博雅;靳清凯;任佳;王海军;冀来喜;
单位：成都中医药大学针灸推拿学院;山西中医药大学第二临床学院;
摘要：目的：探讨“秩边透水道”针法调控铁死亡途径改善弱精子症小鼠生殖功能的可能机制。方法：将60只雄性C57BL/6小鼠随机分成空白组、模型组、针刺组和Fer-1组，每组15只。除空白组外，其余3组小鼠给予环磷酰胺（50 mg·kg-1·d-1）腹腔注射诱导弱精子症模型，连续5 d。针刺组小鼠给予“秩边透水道”针法干预，每次20 min;Fer-1组给予铁死亡抑制剂Fer-1溶液（1 mg/kg）腹腔注射。两组均每日1次，连续干预2周。称量各组小鼠睾丸湿重并计算睾丸系数，采用精子质量检测系统检测小鼠精子质量；ELISA法检测小鼠血清睾酮（T）、卵泡刺激素（FSH）、黄体生成激素（LH）含量；HE染色法观察小鼠睾丸和附睾形态；免疫荧光法检测小鼠睾丸活性氧（ROS）表达水平；生化法检测小鼠睾丸组织丙二醛（MDA）、还原型谷胱甘肽（GSH）和总铁离子（TFe）含量；透射电镜观察小鼠睾丸组织线粒体结构；JC-1染色检测小鼠睾丸组织线粒体膜电位水平；实时荧光定量PCR法和Western blot法检测小鼠睾丸组织溶质转运蛋白家族7成员11(SLC7A11)、谷胱甘肽过氧化物酶4(GPX4)、铁蛋白重链1(FTH1)、长链脂酰-Co A合成酶4(ACSL4)mRNA和蛋白表达。结果：与空白组比较，模型组小鼠睾丸湿重和睾丸系数降低（P<0.01）；精子浓度和精子活力降低（P<0.01）；血清T、FSH和LH含量降低（P<0.01）；睾丸内生精小管结构疏松、管腔变形，精子细胞排列紊乱、精子数量减少；附睾小管管壁变薄，管腔内精子数量较少；睾丸组织ROS表达水平及MDA、TFe含量升高（P<0.01）,GSH含量降低（P<0.01）；线粒体数量减少，嵴结构严重破坏；线粒体膜电位水平降低（P<0.01）；睾丸组织SLC7A11、GPX4、FTH1mRNA和蛋白表达降低（P<0.01）,ACSL4 mRNA和蛋白表达升高（P<0.01）。与模型组比较，针刺组和Fer-1组小鼠睾丸湿重和睾丸系数升高（P<0.01）；精子浓度和精子活力升高（P<0.01）；血清T、FSH和LH含量升高（P<0.01）；睾丸和附睾组织病理结构改善；睾丸组织ROS表达水平及MDA、TFe含量降低（P<0.01）,GSH含量升高（P<0.05）；线粒体形态结构和数量改善；线粒体膜电位水平升高（P<0.01）。与模型组比较，针刺组和Fer-1组小鼠睾丸组织SLC7A11 mRNA表达升高（P<0.05,P<0.01）,GPX4、FTH1 mRNA和蛋白表达升高（P<0.01,P<0.05）,ACSL4mRNA和蛋白表达水平降低（P<0.01）;Fer-1组小鼠睾丸组织SLC7A11蛋白表达升高（P<0.05）。结论：“秩边透水道”针法可能通过减轻铁死亡引发的细胞损伤，改善睾丸功能，从而提升弱精子症小鼠的生殖能力。
关键词：弱精子症;;“秩边透水道”针法;;铁死亡;;氧化应激;;线粒体
基金资助：国家自然科学基金资助项目：82074549;; 山西省中医药管理局基金项目：2023ZYYB048;; 师怀堂新九针学术流派传承工作室项目：2020PY-LP-03
