来源：期刊VIP网 时间：
作者：江丽娜;王志锐;高丽;王秀月;戴文汐;王春花;
单位：天津市结核病控制中心,天津市病原微生物重点实验室;
摘要：目的 探讨sigma factor-sigG调控基因（clpB、dnak、fadE5、lexA、trxB）在结核分枝杆菌（MTB）不同耐药表型中的表达差异，评估其在耐药机制中的作用及其与耐药基因katG、rpoB的潜在关联。方法 选取天津市结核病控制中心门诊部2018—2023年耐药监测期间对异烟肼和利福平同时耐药的耐多药菌株（MDR）、单耐异烟肼（MTBH+）、单耐利福平（MTBR+）和全敏感菌株（S）作为研究对象，所有菌株菌均经熔解曲线法检测耐药基因突变情况，并根据katG(315位点)、rpoB(529～533位点)的突变状态（单突变、联合突变或无突变）进行分组。采用TRIzol法提取菌总株RNA，应用荧光定量聚合酶链式反应技术检测目标基因（clpB、dnak、fadE5、lexA、trxB）的表达水平，以2~(-ΔΔCt)法计算基因表达倍数。采用Mann-Whitney U检验比较耐药组与敏感组的基因表达差异，χ~2检验分析高水平表达率的组间差异，并利用双因素方差分析（two-way ANOVA）进行验证。结果 实验纳入MTB~(H+)、MTB~(R+)、MDR及S菌株各18株，katG315突变与异烟肼耐药相关，rpoB(529～533)突变与利福平耐药相关，而两者联合突变则导致耐多药表型。异烟肼耐药组，lexA基因的表达水平显著高于敏感组（P<0.05）；利福平耐药组，fadE5基因表达显著上调，（P<0.05）；耐多药组中，lexA、fadE5表达水平均显著高于敏感组（均P<0.05）。fadE5基因在所有组中均呈100.00%表达，而clpB、lexA基因在耐多药组中的高水平表达率均显著高于敏感组（均P<0.05）。以sigA为内参基因的双因素方差分析进一步证实，lexA和fadE5基因在耐药组中的表达显著高于敏感组（均P<0.001）。结论 综合3种分析方法，lexA和fadE5基因在耐多药结核分枝杆菌中呈现显著差异表达，提示其可能参与耐药机制。然而这些基因是否与katG和rpoB突变直接相关仍需深入研究。
关键词：单耐异烟肼;;单耐利福平;;结核分枝杆菌;;基因表达
基金资助：天津市卫生健康科技项目资助(No.TJWJ2022MS047)~~
