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作者:郭凯文;徐崇崇;胡亚宁;黄建;
单位:西北农林科技大学林学院·国家林业和草原局黄土高原林木培育重点实验室;西北农林科技大学·国家林业和草原局枣工程技术研究中心;
摘要:【目的】建立枣树花药愈伤组织诱导及植株再生技术体系,为枣树遗传改良提供技术支撑。【方法】以冬枣、骏枣及七月鲜花药为外植体,采用正交试验与单因素试验相结合的方法,系统研究基因型、碳源、基本培养基类型及植物生长调节剂配比对枣花药离体再生的影响。【结果】冬枣、骏枣及七月鲜的花药愈伤组织在添加1.0 mg·L~(-1) 2,4-D+0.4 mg·L~(-1)TDZ+0.4 mg·L~(-1) NAA+30 g·L~(-1)麦芽糖的MS培养基中诱导率最高,分别为59.33%、64.00%和58.67%。适宜冬枣、骏枣及七月鲜花药愈伤增殖的培养基分别为2.5 mg·L~(-1) TDZ+0.4 mg·L~(-1) IBA+0.1 mg·L~(-1) NAA、1.0 mg·L~(-1) TDZ+0.8 mg·L~(-1)IBA和1.5 mg·L~(-1) TDZ+0.8 mg·L~(-1) IBA,增殖系数分别为88.89%、81.11%和78.89%;适宜花药愈伤分化的基本培养基为WPM,激素组合分别为0.8 mg·L~(-1) TDZ+0.5 mg·L~(-1) IBA+0.2 mg·L~(-1) NAA、1.0 mg·L~(-1) 6-BA+0.5 mg·L~(-1) TDZ+0.5 mg·L~(-1) NAA和1.0 mg·L~(-1) TDZ+0.5 mg·L~(-1) IBA+0.2 mg·L~(-1) NAA,分化率分别为48.00%、29.33%和33.33%。生根培养中,添加0.4 mg·L~(-1) IBA和0.3 g·L~(-1)活性炭的1/2MS培养基使冬枣生根率达87.5%。【结论】建立了冬枣、骏枣及七月鲜的离体花药培养体系,获得了七月鲜单倍体植株和完整的冬枣再生植株,该技术体系可显著提高愈伤诱导率与植株再生效率,为枣树倍性育种及遗传转化研究奠定了技术基础。
关键词:枣;;花药;;愈伤组织;;流式细胞术;;单倍体育种
基金资助:国家重点研发计划项目(2024YFD2200601)