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作者：李伟富;袁嘉翊;张湘东;汪志文;夏洪丽;鲁义善;
单位：广东海洋大学水产学院广东省水产动物病害防控与健康养殖重实验室;广东海洋大学深圳研究院广东省水生动物健康评估工程技术研究中心深圳市海水经济动物种苗健康评价公共技术服务平台;
摘要：为研究尼罗罗非鱼(Oreochromis niloticus) LCP1基因的分子特征及其在抵抗无乳链球菌免疫应答中的潜在功能，从尼罗罗非鱼中克隆出了LCP1基因，命名为On LCP1，并对该基因进行生物信息学分析和亚细胞定位分析;运用荧光定量PCR技术分析了经灭活无乳链球菌免疫刺激后On LCP1在各组织中mRNA的表达情况;采用双荧光素酶报告系统检测了过表达LCP1对NF-κB、STAT1、ISRE、IFN-1和IFN-3信号通路活性的影响。结果显示，On LCP1包含1 857个碱基对，可编码一个618氨基酸的蛋白质，On LCP1蛋白被鉴定含有EF臂结构域(钙结合结构域)和两个串联的肌动蛋白结合结构域(ABD)，每个肌动蛋白结合结构域均包含两个钙调蛋白同源(CH)结构域; On LCP1是一个无跨膜的细胞外蛋白，与人类LCP1蛋白的三维结构高度相似，表明其功能可能是保守的;荧光定量PCR分析显示，On LCP1基因在健康尼罗罗非鱼的不同组织中均有表达，尤其在脾脏中表达量最高;研究发现，经灭活无乳链球菌免疫后，On LCP1基因在免疫器官中的表达量显著增加，表明其可能参与了对病原菌的免疫应答;亚细胞定位显示，On LCP1在HEK-293T细胞的细胞质中表达;双荧光素酶报告系统显示，On LCP1显著提高了NF-κB信号通路的活性(P<0.05)，表明该分子可能通过NF-κB通路介导罗非鱼抵御无乳链球菌感染。本研究结果为进一步研究LCP1基因在鱼类先天免疫中的功能提供了科学参考。
关键词：尼罗罗非鱼;;LCP1基因;;无乳链球菌;;mRNA表达分析
基金资助：广东省基础与应用基础研究基金(2021A1515110214)
