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作者：王亮亮;陈观宇;许丽兰;王建民;陈敬华;张建中;
单位：福建医科大学肿瘤临床医学院,福建省肿瘤医院;福建省肿瘤早筛早诊前沿技术研究重点实验室;福建医科大学药学院药物分析学系;福建医科大学附属协和医院胃外科;
摘要：外泌体微小RNA(miRNAs)是常见肿瘤液体活检标志物，与肿瘤诊疗具有较高临床相关性。设计与目标miRNAs部分互补的2种发夹探针（启动发夹探针和辅助发夹探针），miRNAs与2种发夹探针两两杂交，形成三元杂交结构（THS）。开发了一种基于THS驱动的杂交链式反应（HCR）的电化学方法用于外泌体miR-21检测。电极表面进行启动发夹探针固定和己硫醇封闭等修饰；外泌体miR-21存在时，形成THS，暴露启动发夹探针的启动序列，触发HCR，形成长距三明治双链DNA结构，并结合大量亚甲基蓝（MB）电化学信号分子，引起显著电流信号。最优实验条件下，利用方波伏安法检测miR-21引起的MB电流变化值（ΔI）。在miR-21浓度（c）1.00～1.00×10~7 fmol/L范围内，ΔI线性增加，线性方程为ΔI=1.8055+1.6407logc_(miR-21)(R~2=0.9983)，检测限为0.57 fmol/L。本方法可实现肿瘤细胞和血清来源外泌体miRNAs的检测。
关键词：外泌体;;微小RNA;;电化学;;杂交链式反应
基金资助：福建省自然科学基金(2020J01999,2024Y4004);; 国家自然科学基金(21874019);; 福建省科技创新联合资金项目(2021Y9199)资助
