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作者:郭富余;翟悦怡;杨树玲;魏天洋;张宇轩;李勇;王娜;
单位:华北理工大学临床医学院;华北理工大学附属医院耳鼻喉头颈外科;河北医科大学第三医院动物实验室;河北省人民医院耳鼻喉头颈外科;河北医科大学第三医院耳鼻喉头颈外科;
摘要:目的 探究壳聚糖-普鲁士蓝纳米酶(chitosan-prussian blue nanozyme,CS-PB)对过氧化氢诱导的小鼠耳蜗毛细胞(house ear institute-organ of corti 1,HEI-OC1)氧化应激损伤的影响及相关分子机制。方法 体外培养HEI-OC1细胞,不同浓度过氧化氢处理细胞后通过细胞计数试剂盒-8检测细胞活性,建立过氧化氢应激损伤细胞模型,分为对照组、过氧化氢组、过氧化氢+CS-PB组、过氧化氢+N-乙酰半胱氨酸(N-Acetylcysteine,NAC)组,利用DCFH-DA荧光探针技术检测HEI-OC1细胞活性氧的含量,Western Blot检测HEI-OC1细胞肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、白细胞介素-1β(interleukin-1β,IL-1β)、BclXL、Bax蛋白表达水平;免疫荧光染色及激光共聚焦显微镜成像检测HEI-OC1细胞中4-HNE含量。结果 与对照组相比,过氧化氢组细胞活力下降(P<0.0001),Bcl-XL蛋白表达下降,细胞内活性氧、4-HNE、TNF-α、IL-1β、Bax表达升高(P<0.0001);与过氧化氢组比较,过氧化氢+CS-PB组、过氧化氢+NAC组细胞活力升高(P<0.05),Bcl-XL蛋白表达升高,细胞内活性氧、4-HNE、TNF-α、IL-1β、Bax表达降低(P<0.01)。结论 CS-PB能够缓解过氧化氢诱导的HEI-OC1细胞氧化应激所造成的细胞损伤及凋亡。
关键词:HEI-OC1细胞;;纳米酶;;活性氧;;氧化应激;;凋亡
基金资助:中央引导地方科技发展资金项目(236Z7730G)