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作者:杨紫倩;郭薇;陈绍红;刘铀;
单位:广东海洋大学滨海农业学院;广东海洋大学食品科技学院;
摘要:为研究山羊肾细胞(LDG-2)氧化还原状态对小反刍兽疫病毒(PPRV)体外复制的影响,采用MTT法分别测定N-乙酰半胱氨酸(NAC)、维生素C(VC)、还原型谷胱甘肽(GSH)和叔丁基过氧化氢(TBHP)的安全浓度及PPRV感染细胞活力;分别用DCFH-DA荧光探针和ELISA检测了与细胞氧化应激和氧化还原状态有关的活性氧(ROS)水平和丙二醛(MDA)含量,以及超氧化物歧化酶(SOD)、黄嘌呤氧化酶(XOD)、烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(NADPH)氧化酶(NOX)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)的活性;用IFA和Western-blot观察PPRV在LDG-2细胞中的复制与增殖。结果表明,PPRV感染的LDG-2细胞中的ROS水平、MDA含量,以及NOX和XOD活性极显著增加(P<0.001),GSH-Px活性显著降低(P<0.05),PPRV-N蛋白表达水平显著或极显著上调(P<0.05或P<0.01)。NAC和GSH处理能极显著降低PPRV感染细胞的ROS水平、MDA含量,以及NOX和XOD活性(P<0.001),PPRV-N蛋白表达水平显著下调(P<0.05或P<0.01)。经VC和TBHP处理的PPRV感染细胞中ROS水平、MDA含量,以及NOX和XOD活性极显著升高(P<0.01或P<0.001),PPRV-N蛋白表达水平显著上调(P<0.05)。上述结果表明,PPRV感染可诱导LDG-2细胞的氧化应激,NAC和GSH可缓解PPRV感染细胞的氧化应激,进而抑制病毒的复制,TBHP和VC则可通过增强PPRV诱导的氧化应激促进病毒复制。
关键词:小反刍兽疫病毒;;山羊肾细胞;;氧化应激;;病毒复制
基金资助:广东省现代农业产业体系资助项目(2019K127)