来源：期刊VIP网 时间：
作者：翟斌涛;郑红飞;李甲;包碧波;孙万奎;王义军;王耀东;张继瑜;
单位：中国农业科学院兰州畜牧与兽药研究所;甘肃省动物疫病预防控制中心;甘肃农业大学动物医学院;武威市凉州区动物疫病预防控制中心;甘肃省定西市渭源县五竹镇畜牧兽医站;甘肃省张掖市临泽县农业农村局;
摘要：吕氏泰勒虫是一种严重危害养羊业的血液原虫，建立快速、准确的检测方法对其防控至关重要。为开发一种以羊吕氏泰勒虫热休克蛋白90基因（HSP90）为新靶标的PCR检测方法，本研究根据吕氏泰勒虫HSP90基因序列设计特异性引物，通过梯度PCR优化反应条件，并对方法的敏感性、特异性和重复性进行系统评价。结果表明，本研究建立的PCR检测方法的最佳退火温度为60.5℃，退火时间为30 s。对该方法进行的性能评价结果表明，其敏感性高，最低可检测到32.4 pg/??L的基因组DNA（敏感性较18S rRNA靶标提高了3倍以上）；特异性强，与豆状囊尾蚴、多房棘球蚴、弓形虫及球虫的DNA均无交叉反应；重复性好，在不同批次和批内试验中结果稳定。对现场采集的羊血液样品的检测结果表明，18份样品的阳性检出率为27.78%，测序结果表明扩增产物为吕氏泰勒虫。本研究成功建立了基于HSP90基因的羊吕氏泰勒虫PCR检测方法。该方法具有高效、灵敏、特异和可靠的优点，不仅为吕氏泰勒虫的流行病学调查和精准诊断提供了新的有效工具，而且由于HSP90在泰勒虫应激生存和致病中的关键作用，本研究也为后续探索其基因功能、开发靶向药物奠定了坚实基础。
关键词：羊;;吕氏泰勒虫;;HSP90基因;;PCR;;检测方法
基金资助：甘肃省科技支撑计划-乡村振兴专项（24CXNA020）;; 定西市科技计划项目（DX2024BY046）;; 临潭县肉羊产业提质增效关键技术集成与示范（2022YFD1602201）;; 国家肉牛牦牛产业技术体系项目（CARS-37）;; 陇原青年创新创业人才项目（2024QNTD41）;; 兰州市青年科技人才创新项目（2023-QN-73）;; 甘肃省自然基金（23JRRA562）
