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作者：李宁;刘玉芹;王晓;邱聪聪;
单位：滨州市中心医院产科;
摘要：目的 探讨转录因子EB(TFEB)核转位介导的谷胱甘肽过氧化物酶4(GPX4)溶酶体降解在人胚胎滋养层细胞HTR8-S/Vneo铁死亡中的作用。方法 将HTR8-S/Vneo细胞分为正常组、缺氧组、缺氧联合si-NC组(细胞转染si-NC)、缺氧联合si-TFEB组(细胞转染si-TFEB)、缺氧和si-TFEB联合RSL3组(细胞转染si-TFEB并用铁死亡诱导剂RSL3处理)以及缺氧和si-TFEB联合PP242组(细胞转染si-TFEB并用溶酶体激活剂PP242处理)。采用CCK-8试剂盒、划痕实验、 Transwell~(TM)实验分别检测细胞活力、侵袭数量和迁移率。使用FerroOrange铁离子探针检测细胞中Fe~(2+)的含量。利用DCFH-DA活性氧(ROS)荧光探针检测ROS水平。ELISA检测乳酸脱氢酶(LDH)、丙二醛(MDA)、谷胱甘肽(GSH)含量及超氧化物歧化酶(SOD)活性。Western blot法检测TFEB、磷酸化TFEB(p-TFEB)、 GPX4蛋白表达以及TFEB核转位情况。利用溶酶体绿色荧光探针检测细胞溶酶体荧光强度。结果 与正常组相比，缺氧组细胞活力、侵袭数量和迁移率显著减少，细胞中Fe~(2+)水平、 ROS荧光强度、 LDH和MDA水平显著增加，SOD活性和GSH水平显著减低，TFEB、 p-TFEB蛋白表达显著增加，GPX4蛋白表达显著减少，TFEB发生核转位，溶酶体荧光强度增加。与缺氧联合si-NC组相比，缺氧联合si-TFEB组细胞活力、侵袭数量和迁移率显著增加，铁死亡水平降低，TFEB核转位被抑制，溶酶体荧光强度降低。与缺氧联合si-TFEB组相比，缺氧和si-TFEB联合RSL3组HTR8-S/Vneo细胞铁死亡各项指标被逆转。与缺氧联合si-TFEB组相比，缺氧和si-TFEB联合PP242组细胞铁死亡水平升高。结论 抑制TFEB核转位进而降低人胚胎滋养层细胞HTR8-S/Vneo铁死亡，其机制可能与抑制GPX4的溶酶体降解有关。
关键词：转录因子EB(TFEB);;谷胱甘肽过氧化物酶4(GPX4);;子痫;;铁死亡
