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作者：黄岩;林淑婷;邓菊;梁晶婕;陈天圣;
单位：海水养殖生物育种全国重点实验室,集美大学水产学院;鳗鲡现代产业技术教育部工程研究中心;
摘要：青鳉(Oryzias latipes)是研究性别分化和生殖调控的重要模式鱼类，前期通过青鳉性腺转录组发现eef1a1l3 mRNA在卵巢中高表达，而在精巢几乎不表达，推测其参与性别分化和卵巢发育的调控。生物信息学分析显示，Eef1a1l3蛋白在硬骨鱼类中非常保守。为探究eef1a1l3基因的功能，通过半定量PCR(SqRT-PCR)绘制了eef1a1l3基因在不同组织和早期不同发育时期的表达谱。通过抗原选取、原核表达、蛋白纯化以及动物免疫实验获取Eef1a1l3多克隆抗体，并对该抗体进行了特异性的检测以及效价的鉴定。结果显示，eef1a1l3 mRNA在成体组织中仅在卵巢特异表达，在早期胚胎发育阶段呈现母源性表达。制备的Eef1a1l3多克隆抗体与抗原结合的最大稀释倍数为1∶64 000,显示出良好的免疫原性，并且Eef1a1l3蛋白在青鳉性腺中的卵巢而非精巢中有表达，这与mRNA表达模式一致。综上，eef1a1l3基因可能是早期胚胎发育和卵巢发育的重要调控因子，并且制备的Eef1a1l3多克隆抗体可以应用于青鳉及其他硬骨鱼类eef1a1l3基因功能的相关研究。
关键词：青鳉(Oryzias latipes);;eef1a1l3基因;;多克隆抗体;;表达模式;;性别分化
基金资助：福建省自然科学基金资助项目(2022J05149);; 国家自然科学基金资助项目(32273127);; 福建省教育厅项目(JAT210233)
