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作者：欧阳紫微;董雷;王琰;程远志;朱仁弟;周仁鹏;赵英杰;胡伟;
单位：安徽医科大学药学院;安徽医科大学第二附属医院药物临床试验研究中心;
摘要：目的 探讨2-氨基乙氧基苯硼酸(2-APB)对H_2O_2诱导的软骨细胞凋亡的作用及其机制。方法 实验分为Control组、H_2O_2组、2-APB组和H_2O_2+2-APB组。CCK-8法检测各组细胞活力;显微镜下观察2-APB对H_2O_2诱导的软骨细胞形态变化的影响; TUNEL法和流式细胞术检测软骨细胞凋亡情况;流式细胞术检测脂质活性氧(ROS)水平; Western blot法检测2-APB对H_2O_2诱导的各组细胞中CleavedPARP、p-PKCα和HIF-1α蛋白的表达情况;免疫荧光法检测PKCα抑制剂BIM-Ⅰ对H_2O_2诱导的各组细胞中HIF-1α的荧光表达情况。结果 2-APB对H_2O_2诱导的软骨细胞凋亡具有抑制作用，且当2-APB浓度为100μmol/L时抑制效果最为显著(F=235.80,P <0.01); 2-APB能够抑制H_2O_2所致软骨细胞凋亡阳性率(F=114.80,P <0.01)以及ROS的水平(F=52.99,P <0.01)，并且抑制Cleaved-PARP(F=10.10,P <0.05)、p-PKCα(F=24.56,P <0.05)和HIF-1α(F=6.85,P <0.05)蛋白的表达; PKCα抑制剂BIM-Ⅰ能够抑制H_2O_2所致HIF-1α荧光强度的增加。结论 2-APB可以通过抑制PKCα/HIF-1α通路减少H_2O_2诱导的软骨细胞凋亡，进而保护软骨细胞。
关键词：2-氨基乙氧基苯硼酸;软骨细胞;细胞凋亡;H_2O_2;PKCα/HIF-1α通路
基金资助：国家自然科学基金(编号：82071591、82371575、82204405); 安徽省自然科学基金(编号：2108085QH383)
