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作者:闫嘉欣;刘炳男;高子浩;张琳惠;李嘉;张慈;陶晨雨;李俊杰;夏威;
单位:河北农业大学动物科技学院;河北省牛羊胚胎技术创新中心;
摘要:为研究褪黑素(MLT)对绵羊GV期卵母细胞玻璃化冷冻效果的影响,选取具有3层以上致密完整卵丘细胞且胞质均匀的卵丘-卵母细胞复合体,在玻璃化冷冻解冻液中添加不同浓度(0、10~(-11)、10~(-9)、10~(-7)、10~(-5) mol/L)MLT,解冻后检测体外成熟液培养24 h后卵母细胞以及新鲜组卵母细胞活性氧(ROS)、Ca~(2+)、线粒体膜电位(MMP)水平。结果:与新鲜组相比,0 mol/L MLT组ROS、Ca~(2+)水平显著升高(P<0.05),MMP水平显著降低(P<0.05);相较于0 mol/L MLT组,在玻璃化冷冻解冻液中添加MLT可显著降低绵羊玻璃化卵母细胞ROS和Ca~(2+)水平(P<0.05),并显著提升卵母细胞MMP水平(P<0.05),其中绵羊GV期卵母细胞玻璃化冷冻过程中MLT的最适添加浓度为10~(-9) mol/L;与0 mol/L MLT组相比,10~(-9) mol/L组可显著提高卵母细胞体外受精后卵裂率(68.64%vs 58.03%,P<0.05)与囊胚率(18.97%vs 5.96%,P<0.05)。本研究证实在玻璃化冷冻解冻液中补充MLT可缓解绵羊GV期卵母细胞冷冻损伤并提高其发育潜能。
关键词:绵羊;卵母细胞;褪黑素;玻璃化
基金资助:国家重点研发计划项目(2021YFD1200401); 河北省自然科学基金联合基金项目(C2023204007); 河北省教育厅重点项目(ZD2022005); 河北省留学回国人才项目(ZD20220513); 河北农业大学人才引进专项项目(YJ2021013)