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畜牧与兽医2025年第04期:猪萨佩罗病毒VP4蛋白多克隆抗体制备及功能验证

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作者:钟祖昌;李本强;陶洁;程靖华;石迎;刘佩红;唐攀;焦嘉杰;刘惠莉;

单位:上海海洋大学水产与生命学院;上海市农业科学院畜牧兽医研究所/上海市农业遗传育种重点实验室;上海市种猪工程技术中心;

摘要:为深入揭示猪萨佩罗病毒(porcine sapelovirus, PSV)致病机制,以毒株SHCM2019为研究对象,原核表达VP4蛋白并制备多克隆抗体。根据VP4氨基酸序列进行PSV遗传进化分析,然后将VP4基因与原核表达载体连接,经诱导表达得到可溶性VP4蛋白。纯化后的VP4蛋白免疫BALB/c小鼠,制备多克隆抗体并进行ELISA、Western blot、间接免疫荧光试验(IFA)验证其反应性。ELISA结果显示,多克隆抗体效价达1∶128 000;Western blot和IFA结果表明,其能特异性识别和结合PSV,说明重组VP4蛋白具有较好的免疫原性和反应原性。本研究成功表达了VP4蛋白并制备了多克隆抗体,为VP4蛋白功能研究奠定基础。

关键词:猪萨佩罗病毒;VP4蛋白;原核表达;多克隆抗体

基金资助:上海市农业科技创新项目(2023-02-08-00-12-F04612); 上海市农业科学院动物疾病防控卓越团项目(沪农科卓[2022]012)