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作者：代昕宇;胡博;邓效禹;张成琪;李昀真;李甜甜;孙亚杰;许丽文;白雪;
单位：中国农业科学院特产研究所;
摘要：病毒纯度是抗体制备和疫苗免疫效果提升的关键，本文利用Purose shell V15离子交换层析和Sepharose 4FF分子筛层析分别建立了犬细小病毒(CPV)的纯化方法。将CPV经过离心澄清和膜包浓缩后，用AKTA蛋白纯化仪结合Purose shell V15和Sepharose 4FF分别进行纯化，最后使用超滤管浓缩，通过病毒含量测定、总蛋白回收率测定、SDS-PAGE、Western blot和电镜观察分析病毒的纯化效果。结果：2种方法纯化后病毒形态典型，病毒颗粒大小约20 nm,总蛋白去除率97%以上，回收率71%以上；Purose shell V15纯化后的病毒经SDS-PAGE和Western blot分析显示无细胞成分的杂带，而Sepharose 4FF纯化后的病毒有少量的牛血清白蛋白条带。本试验结果表明这2种方法均可用于CPV的纯化，Purose shell V15纯化后的病毒纯度更高。
关键词：犬细小病毒;纯化;离子交换;分子筛
基金资助：国家自然科学基金项目(32100408); 吉林省科技发展计划基金(20200201126JC,20200402111NC)
