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作者：孟卫芹;王金良;吴信明;唐娜;李通;石竞楠;董帅;沈志强;
单位：山东省滨州畜牧兽医研究院;青岛农业大学动物医学院;内蒙古民族大学生命科学与食品学院;河北工程大学生命科学与食品工程学院;
摘要：为建立一种山羊痘病毒(GTPV)抗体快速检测方法，试验将携带GTPV结构蛋白P32基因的重组质粒pET28a-P32转化至大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞中，经IPTG诱导后获得了重组蛋白，纯化后经Western blot鉴定表明该蛋白具有良好的特异性和反应原性。以荧光微球为标记材料对P32蛋白进行标记，通过优化反应条件制备了快速检测GTPV抗体的荧光微球免疫层析试纸条，并对其性能进行评价。结果：该试纸条与山羊副流感病毒3型(CPIV3)、小反刍兽疫病毒(PPRV)、羊口疮病毒(ORFV)的阳性血清均无交叉反应；阳性血清稀释至800倍仍能检出阳性，敏感性较高；批内变异系数小于10%,批间变异系数小于15%,稳定性较好；与ELISA检测方法对比的总符合率为92.5%。综上，本试验建立的荧光微球试纸条可用于GTPV抗体的快速检测和流行病学调查。
关键词：山羊痘病毒;P32蛋白;荧光微球;抗体
基金资助：山东省羊产业技术体系岗位专家项目(SDAIT-10-07); 滨州市农社领域科技创新政策引导计划项目(2023SHFZ004)
