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作者：李艳伟;窦报敏;王慎军;吕中茜;李威;徐枝芳;刘阳阳;徐媛;房钰鑫;郭永明;郭义;
单位：天津中医药大学实验针灸学研究中心;
摘要：目的：探究大脑初级体感皮层（S1）脑区趋化因子CXC配体1(CXCL1)及趋化因子CXC受体2(CXCR2)参与针刺镇痛的作用机制，进一步揭示针刺镇痛的神经-免疫学机制。方法：将热痛阈值相对稳定的BALB/c小鼠足底注射0.05 mL完全弗氏佐剂（CFA）建立佐剂性关节炎（AIA）模型后，随机分为单纯荧光组和荧光标记CXCL1组，每组2只。荧光标记CXCL1组小鼠尾静脉注射AF750荧光标记CXCL1重组蛋白，并通过小动物活体成像技术，观察荧光及荧光标记CXCL1在AIA小鼠体内的主要富集脏器及脑的荧光富集情况。另取热痛阈值相对稳定的Wistar大鼠，右足底注射0.1 mL CFA建立AIA模型，随机分为模型组、针刺组，每组12只，取12只Wistar大鼠右足底注射等体积的0.9%氯化钠溶液作为盐水组。针刺组大鼠针刺“足三里”1次/d，针刺持续7 d，治疗结束后采用热痛仪测量大鼠右侧足底热缩足潜伏期即热痛阈值；利用ELISA、免疫荧光及实时荧光定量PCR技术，检测文献报道的可能表达CXCR2及阿片肽受体的多个疼痛相关脑区CXCL1蛋白含量及S1脑区CXCL1阳性细胞数与mRNA表达水平，以期探明前期研究结果中针刺后升高的血清CXCL1的作用脑区；采用ELISA法检测各组大鼠S1脑区中CXCR2蛋白含量，采用实时荧光定量PCR法检测S1脑区中CXCR2、μ-阿片肽受体（MOR）的mRNA表达，采用免疫荧光双标法将CXCR2分别与星形胶质细胞标记物胶质纤维酸性蛋白（GFAP）、神经元标记物NeuN及MOR共染，检测CXCR2在S1脑区中的表达细胞及是否与MOR共表达。结果：与单纯荧光组相比，荧光标记CXCL1组小鼠脑组织中有较强的荧光信号。与盐水组相比，模型组大鼠右侧足底热痛阈值均明显降低（P<0.01）,S1脑区中CXCR2 mRNA表达升高（P<0.05）；与模型组相比，针刺组第2～7天热痛阈值、S1脑区中CXCL1蛋白含量、CXCR2蛋白含量及mRNA表达、MOR mRNA表达均升高（P<0.05,P<0.01）；针刺组大鼠S1脑区中CXCR2分别与NeuN及MOR有共染，表明CXCR2存在于神经元和MOR阳性神经元中，而不存在于GFAP阳性星形胶质细胞中。结论：针刺改善AIA大鼠炎性痛的作用机制可能与其上调S1脑区中CXCL1蛋白含量及S1脑区神经元上的CXCR2、促进神经元表达MOR有关。
关键词：针刺镇痛;;佐剂性关节炎;;炎性痛;;CXC配体1/CXC受体2;;大脑初级体感皮层区(S1);;阿片肽受体
基金资助：国家自然科学基金重点项目（No.82030125）;国家自然科学基金面上项目（No.81873369、81973939）
