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作者：朱海滨;金传阳;周航;孙征;许骞;陆成轩;周子秋;熊嘉玮;张建斌;
单位：南京中医药大学第二附属医院/江苏省第二中医院;北京大学分子医学南京转化研究院;
摘要：目的：研究不同温度热刺激“足三里”的中枢响应规律，分析中枢响应的温度差异性。方法：健康成年C57BL/6j小鼠6只，采用动物脑立体定位仪定位小鼠大脑左侧初级体感皮层后肢区（S1HL），注射0.3μL腺相关病毒，通过双光子显微镜观察其神经元钙活动荧光成像，以荧光强度显示神经元中的钙离子浓度。分别以43、45、47℃热刺激小鼠右侧“足三里”，使用双光子显微镜直接记录小鼠大脑左侧S1HL神经元活动，观察并比较S1HL神经元对3种温度热刺激“足三里”的响应差异性，包括热刺激后2 s内的即时最大钙尖峰值和即时钙尖峰频率，3.5 min内的短时最大钙尖峰值、短时钙尖峰频率和钙尖峰持续时间，以及3 min内的分时段最大钙尖峰值和分时段钙尖峰频率。结果：与常温比较，43、45、47℃热刺激“足三里”均可使小鼠左侧S1HL神经元的即时最大钙尖峰值、即时钙尖峰频率、短时最大钙尖峰值、短时钙尖峰频率和钙尖峰持续时间升高（P<0.001,P<0.01）。不同温度热刺激比较，从即时最大钙尖峰值来看，小鼠S1HL神经元对47℃热刺激响应程度最高（P<0.001）；从即时钙尖峰频率来看，其对45℃热刺激响应最频繁（P<0.001）。从短时最大钙尖峰值来看，不同温度热刺激对其影响差异无统计学意义；从短时最大钙尖峰频率来看，小鼠S1HL神经元对45℃热刺激响应最频繁（P<0.001）。从钙尖峰持续时间来看，小鼠S1HL神经元对45℃热刺激响应更为明显（P<0.01）。从神经元响应分时段分析来看，在3 min内，43、45、47℃热刺激下，小鼠S1HL神经元最大钙尖峰值都在第2分钟达到最高（P<0.001）；钙尖峰频率与热刺激时段无显著联系。结论：S1HL神经元对43、45、47℃热刺激“足三里”均有响应，且响应存在特定温度差异性，小鼠S1HL神经元对45℃热刺激“足三里”响应较为活跃。
关键词：初级体感皮层;;热刺激;;足三里;;神经元响应;;双光子技术
基金资助：国家自然科学基金项目（No.81973947）;; 南京中医药大学自然科学基金项目（No.XZR2020053）;; 2021年南京江北新区新型研发机构青年研究员项目
