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作者：杨超群;张帆;艾书晴;黄欣;何鑫;宋佰芬;于永忠;
单位：黑龙江八一农垦大学生命科学技术学院;中国农业大学动物医学院;
摘要：为了探究引起黑龙江省大庆市某养羊场绵羊发生疑似羊口疮的病原及其遗传进化特征，试验采集发病绵羊痂皮，对其中的病毒进行分离培养、PCR检测、主要毒力基因序列分析、间接免疫荧光试验及动物回归试验。结果表明：分离到1株羊口疮病毒(Orf virus, ORFV),命名为OV-HLJ06,该毒株接种牛肾细胞(madin-darby bovine kidney cell, MDBK) 72 h后，80%细胞出现明显的致细胞病变效应(cytopathic effect, CPE)。OV-HLJ06株B2L基因编码氨基酸序列与ORFV参考株的相似性为97.6%～98.9%,其中与OV-NZ2株相似性最高，与OV-HLJ04株相似性最低；OV-HLJ06株F1L基因编码氨基酸序列与ORFV参考株的相似性为96.2%～98.5%,其中与OV-NZ2株相似性最高，与OVHLJ05相似性最低；OV-HLJ06株GIF基因编码氨基酸序列与ORFV参考株的相似性为86.4%～99.2%,其中与OV-NZ2株和OV-IHUMI-1株相似性最高，与OV-Cam/09株相似性最低；OV-HLJ06株VEGF基因编码氨基酸序列与ORFV参考株的相似性为40.4%～100%,其中与OVHLJ05株(ORFV-NZ7基因型)相似性最高，与OV-Fujian-YX株相似性最低。在间接免疫荧光试验中，OV-HLJ06株可与ORFV B2L蛋白2E4单克隆抗体特异性结合，发出绿色荧光。将该毒株接种绵羊口唇黏膜部位3 d后出现了红疹，5 d后出现小型脓疱，10 d后形成了痂皮。说明引起该养羊场绵羊发病发生羊口疮的病原为ORFV,该毒株与OV-NZ2株亲缘关系较近，属于ORFV-NZ7基因型。
关键词：羊传染性脓疱;;羊口疮病毒;;病毒分离;;病毒鉴定;;毒力基因;;遗传进化分析
基金资助：国家自然科学基金面上项目(31172353;32272991);; 黑龙江省自然科学基金项目(C2017052);; 黑龙江八一农垦大学博士科研启动基金项目(B2010-09)
