来源:期刊VIP网 时间:
作者:柯野;植嘉姬;杨李;邱小娴;谷敏;屈奇奇;
单位:韶关学院生物与农业学院;
摘要:对鸡毛高效降解Deinococcus sp. RM菌株的基因组,及其降解鸡毛过程中的转录组进行测序,筛选出表达量高的蛋白酶基因重组至Pichia pastoris GS115菌株中进行诱导表达,对重组蛋白酶分离纯化、酶学性质以及降解鸡毛的效果进行测定。结果表明,RM菌株共4 132个基因,3 844个基因表达,其中444个基因表达胞外蛋白,26个为胞外蛋白酶。较高表达量的sp02200基因在P. pastoris GS115菌株中获得成功表达,该重组蛋白酶rSp02200属于一种新型热应激需求蛋白家族DegQ类蛋白酶,最适反应温度为37℃,在30℃以下保持较好稳定性,最适pH为7.5,在p H 4.0~11.0能保持70%以上蛋白酶活性,并且能将长、粗的鸡毛羽轴和羽枝降解为细小的羽轴和羽枝。因此,Sp02200蛋白酶是RM菌株降解鸡毛过程中的一种重要酶,这为探究RM菌株降解鸡毛相关基因的研究提供了参考。
关键词:鸡毛降解;;Deinococcus sp. RM菌株;;转录组;;克隆表达;;酶学性质
基金资助:广东省基础与应用基础研究项目(2019A1515011089);; 广东省科技创新战略专项资金(大学生科技创新培育)资助项目(pdjh2022a0469);; 韶关学院第二十二批教育教学改革研究项目(SYJY20211115);; 韶关学院2022年度校级“质量工程”建设项目(27)