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作者：王金右;车艳杰;宋新宇;张博文;付旭彬;孙英峰;
单位：天津农学院动物科学与动物医学学院;天津瑞普生物技术股份有限公司;
摘要：为了解2023年12月—2024年9月我国H9N2亚型禽流感病毒（AIV）的分子流行病学和遗传变异情况，并筛选免疫原性更好的H9N2亚型AIV疫苗株，本试验自甘肃、广西、山东、河北、辽宁、黑龙江、广东、湖北、江苏、安徽、河南、内蒙古和山西采集280份疑似AIV发病肉鸡和蛋鸡的临床样本，进行AIV-H9亚型核酸检测、HA基因测序分析和病毒分离，并采用分离毒制备油乳剂灭活疫苗，与购买的商品化三联灭活疫苗进行交叉血凝抑制（HI）试验和攻毒保护试验，以筛选出免疫原性较好的毒株进行攻毒保护试验。结果显示，280份样本中24份呈H9N2亚型AIV阳性，24份阳性样本的HA基因均属于h9.4.2.5分支（也被称为Y280谱系），它们之间的HA核苷酸同源性为90.10%～99.90%，氨基酸同源性为91.44%～99.82%。24份阳性样本的HA蛋白裂解位点均为~(333)PSRSSR↓GLF~(341)，符合低致病性AIV特征；HA蛋白受体结合位点变异主要表现为在R381K、Q234L和T198V的突变。将24份阳性样本接种无特定病原体（SPF）鸡胚获得9株分离毒，其中A/Chicken/Shandong/JY17/2024(H9N2）（简称SD17株）交叉HI抗体滴度较高，且制备的油乳剂灭活疫苗对流行毒株的免疫保护率不低于90%。结果表明，h9.4.2.5分支为我国H9亚型AIV的HA基因主流分支，结合关键氨基酸位点分析，H9亚型AIV逐步向哺乳动物适应性和气溶胶传播方向发生变异。本试验分离的A/Chicken/Shandong/JY17/2024(H9N2）制备的油乳剂灭活疫苗对H9N2亚型AIV流行毒株的免疫保护效果良好，可作为疫苗候选株用于研制新型H9N2亚型AIV疫苗。
关键词：H9N2亚型禽流感病毒;;流行病学调查;;HA基因;;交叉免疫保护
