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中国兽医杂志2025年第07期:水禽细小病毒LAMP及其可视化通用检测方法的建立

来源:期刊VIP网 时间:


作者:戴银;周慧琴;谷思琴;胡晓苗;王洁茹;殷冬冬;尹磊;沈学怀;潘孝成;赵瑞宏;周学利;侯宏艳;

单位:安徽省农业科学院畜禽疫病研究中心;安徽省畜禽产品安全重点实验室;

摘要:为了建立鹅细小病毒(GPV)和番鸭细小病毒(MDPV)通用的检测方法,本试验以GPV和MDPV两种水禽细小病毒的NS基因保守序列作为靶标,设计了1组特异性引物,优化建立了水禽细小病毒的环介导等温扩增(LAMP)和LAMP-羟基萘酚蓝(HNB)可视化通用检测方法,并对2种方法的特异性和灵敏性进行检测。采用常规PCR、LAMP和LAMP-HNB对10份水禽临床样品进行检测,以评估2种方法的实用性。结果显示,LAMP方法的最佳反应温度为65℃、反应时间为60 min。2种方法仅能扩增GPV和MDPV,而对其他5种常见水禽病毒的检测结果均为阴性,最低检出浓度均为1×10~(-5) ng/μL。2种方法与常规PCR的检测结果一致,符合率达100%。结果表明,建立的LAMP方法和LAMP-HNB可视化方法具有灵敏性好、特异性高、仪器要求低和可视化等优点,可为水禽细小病毒的现场快速检测提供技术支撑。

关键词:鹅细小病毒(GPV);;番鸭细小病毒(MDPV);;NS基因;;环介导等温扩增(LAMP);;可视化

基金资助:安徽省科技重大专项(202003a06020012);; 安徽省家禽产业技术体系项目(AHCYJSTX-06);; 安徽省农业科学院团队项目(2025YL044)