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作者：向欣;杨晨晨;林川;陈红;吕皓;韩春梅;
单位：塔里木大学动物科学与技术学院;农业农村部环塔里木畜草资源利用重点实验室;塔里木大学生命科学与技术学院;新疆生产建设兵团塔里木盆地生物资源保护与利用重点实验室;
摘要：为探究WNT5B基因在塔里木马鹿茸再生发育中的作用，以塔里木马鹿茸为试验材料，克隆WNT5B基因CDS区序列，利用大肠杆菌重组技术表达塔里木马鹿WNT5B蛋白，并采用生物信息学方法进行序列分析；利用实时荧光定量PCR和免疫荧光检测WNT5B基因在鹿茸不同组织中的表达变化。结果显示，塔里木马鹿WNT5B基因CDS区长1 074 bp，编码358个氨基酸；与欧洲马鹿和加拿大马鹿的氨基酸序列相似性达100%，与牛和白尾鹿的相似性为99.4%；塔里木马鹿WNT5B蛋白的二级结构主要以α-螺旋和无规则卷曲为主。在37℃、IPTG浓度1 mM的诱导条件下，3～48 h内成功表达塔里木马鹿茸WNT5B蛋白，分子量约40 kDa。WNT5B基因在塔里木马鹿茸的茸皮、间充质、软骨和骨4个组织中均有表达，其中在骨组织中的表达量最高，极显著高于其他组织（P<0.01）；其次在软骨中的表达量极显著高于茸皮和间充质组织（P<0.01）。综上，本研究成功获得了塔里木马鹿茸WNT5B基因CDS区序列，并确定了WNT5B在鹿茸不同组织中的表达特征。
关键词：塔里木马鹿;;鹿茸;;WNT5B基因;;分子克隆;;免疫荧光;;原核表达
基金资助：国家自然科学基金项目（31860629）;; 塔里木大学研究生科研创新项目（TDGRI202336）
