来源：期刊VIP网 时间：
作者：陈文赏;尹明景;朱继金;
单位：广西医科大学第一附属医院急诊科;
摘要：目的 探讨胸腺基质淋巴细胞生成素（TSLP）在对乙酰氨基酚（APAP）诱导的急性肝损伤小鼠模型中的作用及其机制。方法 16只野生型（WT）雄性C57BL/6J小鼠被随机分为2组，分别为control组和APAP组，每组8只；APAP组按照400 mg/kg的剂量腹腔注射APAP溶液建模，control组注射等体积生理盐水，6 h后进行取材。全自动化学分析仪检测血清ALT及AST，实时定量PCR方法检测肝组织炎症因子TNF-α和IL-6的m RNA表达，试剂盒检测肝组织匀浆中谷胱甘肽（GSH）含量，实时定量PCR、Western Blot方法检测TSLP的转录和蛋白水平的表达。另取22只WT雄性C57BL/6J小鼠，随机分为3组，分别为control组（n=8）、APAP组（n=8）和APAP+r TSLP组（n=6),APAP+r TSLP组先腹腔注射r TSLP溶液，同时control组、APAP组注射溶剂PBS;30 min后APAP+r TSLP组和APAP组注射APAP溶液，control组注射等体积生理盐水。检测3组小鼠血清ALT及AST；通过HE染色观察小鼠肝脏的病理变化；试剂盒检测肝组织匀浆中氧化应激指标丙二醛（MDA）、超氧化物歧化酶（SOD）水平；Western Blot方法检测自噬相关蛋白LC3Ⅰ/Ⅱ、Beclin1、P62，以及核因子E2相关因子2(Nrf2）、蛋白激酶B(Akt）、磷酸化-Akt(p-Akt）、哺乳动物雷帕霉素靶蛋白（m TOR）、磷酸化-m TOR(p-m TOR）等分子的蛋白表达。此外，取16只WT雄性C57BL/6J小鼠和16只沉默TSLP受体（TSLPR~(-/-)）小鼠，分为WT小鼠control组、WT小鼠APAP组、TSLPR~(-/-)小鼠control组和TSLPR~(-/-)小鼠APAP组，每组8只，WT小鼠APAP组和TSLPR~(-/-)小鼠APAP组按照400 mg/kg的剂量腹腔注射APAP溶液建模，WT小鼠control组和TSLPR~(-/-)小鼠control组注射等体积生理盐水。检测4组小鼠血清ALT、AST以及肝组织的MDA含量；Western Blot方法检测LC3Ⅰ/Ⅱ、Akt、p-Akt的蛋白表达。计量资料两组间比较采用成组t检验；多组间比较采用单因素方差分析，进一步两两比较采用LSD-t检验。结果 APAP诱导急性肝损伤小鼠建模成功后，肝脏TSLP的m RNA和蛋白表达水平较control组均升高（P值均<0.01）。在应用r TSLP的研究中，相比于control组，APAP组的ALT、AST明显升高（P值均<0.001），肝组织HE染色呈现沿中央静脉放射状坏死，氧化应激指标SOD、Nrf2蛋白表达下降，MDA水平上升（P值均<0.01）；而APAP+r TSLP组较APAP组，ALT、AST下降，肝组织坏死面积减小，SOD、Nrf2蛋白表达升高，MDA下降（P值均<0.05);APAP+r TSLP组与control组相比，LC3Ⅰ/Ⅱ、Beclin1、P62、p-Akt、p-m TOR蛋白表达差异均有统计学意义（P值均<0.01）。在应用TSLPR~(-/-)小鼠的研究中，建模后，TSLPR~(-/-)小鼠相较于WT小鼠，ALT、AST、MDA升高，LC3Ⅰ/Ⅱ、p-Akt蛋白表达下降（P值均<0.01）。结论 TSLP能够增加自噬，降低氧化应激，从而改善过量APAP引起的急性肝损伤，并且其作用机制可能与PI3K/Akt信号通路的激活和m TOR的抑制有关。
关键词：胸腺基质淋巴细胞生成素;;醋氨酚;;化学性与药物性肝损伤;;小鼠,近交C57BL
基金资助：广西壮族自治区教育厅自然科学研究项目（2023KY0117）;; 广西自然科学基金（2015GXNSFAA139156）~~
