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作者：赵韦;徐德苹;廖开楠;蔡春林;臧丹丹;周海胜;
单位：安徽医科大学生物化学教研室;安徽医科大学病理生理学教研室;安徽医科大学科研实验中心;
摘要：目的 探究降血压药物氨氯地平对足细胞内Ca~(2+)内流及其自噬的影响。方法 体外常规培养永生化的人足细胞(HPC),使用血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)以及L型Ca~(2+)阻断剂氨氯地平单独或者联合处理HPC细胞，Ca~(2+)成像系统实时检测药物处理后HPC细胞内Ca~(2+)通量的瞬时变化；Western blot法检测自噬标志蛋白LC3B-Ⅱ/LC3B-Ⅰ比值变化、Beclin-1、P62和凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax的表达水平；流式细胞术检测488 nm处Fluo-4AM的阳性细胞数以分析HPC细胞内Ca~(2+)内流水平；Lyso-Tracker Green活细胞染色分析溶酶体荧光强度；流式细胞术检测HPC细胞凋亡率。结果 与对照组比较，AngⅡ组Ca~(2+)瞬时通量和Fluo-4AM阳性细胞数显著增加(P<0.001)、自噬标志蛋白LC3B-Ⅱ/LC3B-Ⅰ比值(P<0.001)和Beclin-1的蛋白表达(P<0.01)均降低、P62的表达升高(P<0.01)、溶酶体荧光强度减弱(P<0.05)、细胞凋亡率升高(P<0.000 1)、凋亡相关蛋白Bcl-2表达降低(P<0.01)、Bax蛋白升高(P<0.001)。与对照组比较，氨氯地平组Fluo-4AM阳性细胞数显著降低(P<0.001)、LC3B-Ⅱ/LC3B-Ⅰ比值(P<0.001)和Beclin-1的蛋白表达(P<0.001)均升高、P62蛋白表达降低(P<0.05)、溶酶体荧光强度增强(P<0.01)、细胞凋亡率降低(P<0.01)、Bcl-2蛋白表达升高(P<0.001)、Bax蛋白降低(P<0.001)。与AngⅡ组比较，AngⅡ+氨氯地平组Fluo-4AM阳性细胞数显著降低(P<0.001)、LC3B-Ⅱ/LC3B-Ⅰ比值(P<0.01)以及Beclin-1的蛋白表达升高(P<0.05)、P62蛋白降低(P<0.01)、溶酶体荧光强度增加(P<0.05)、细胞凋亡率降低(P<0.001)、Bcl-2蛋白表达升高(P<0.001)、Bax蛋白表达降低(P<0.001)。结论 氨氯地平抑制足细胞内Ca~(2+)内流，促进足细胞自噬、抑制凋亡，对于预防高血压肾病发生具有一定的作用。
关键词：足细胞;;氨氯地平;;血管紧张素Ⅱ;;自噬;;Ca~(2+);;细胞凋亡
基金资助：安徽省高校学科(专业)拔尖人才学术资助项目(编号：gxbjZD2021046)~~
