来源：期刊VIP网 时间：
作者：赵俊梅;梁亚茜;罗庆;
单位：南昌大学第一附属医院高新医院;南昌大学第一附属医院耳鼻咽喉头颈外科;
摘要：目的:慢性鼻窦炎伴鼻息肉(chronic rhinosinusitis with nasal polyps, CRSwNP)患者的鼻腔黏膜中存在组织重塑，上皮间质转化(epithelial-mesenchymal transition, EMT)在其中扮演关键角色，但其机制尚未完全阐明。本研究的目的在于深入探讨CRSwNP的发病机制，为其治疗提供新的思路。方法:(1)免疫组织化学检测CRSwNP组的鼻息肉和正常对照组的鼻黏膜中的NLRP3及EMT相关指标(E-cadherin, Vimentin)的表达情况；(2)体外培养原代人鼻黏膜上皮细胞(primary human nasal epithelial cells, HNECs),用不同浓度(0、10、25、50、100 ng/mL)的人嗜中性粒细胞弹性蛋白酶(human neutrophil elastase, HNE)处理细胞，在刺激24 h后用qRT-PCR和蛋白免疫印迹实验方法检测E-cadherin, Vimentin, NLRP3的mRNA和蛋白表达情况；(3)完成上述试验后，选取作用效果最佳浓度的HNE刺激细胞，在0、24、36、48、72 h后收集细胞，用qRT-PCR和蛋白免疫印迹实验方法检测E-cadherin, Vimentin, NLRP3(Nod-Like Receptor Protein 3)的mRNA和蛋白表达情况；(4)用NLRP3抑制剂MCC950预处理鼻黏膜上皮细胞，再用HNE刺激，通过qRT-PCR和蛋白免疫印迹实验法检测EMT相关指标(e-cadherin, Vimentin)及NLRP3的表达。结果:(1)CRSwNP患者鼻息肉中的NLRP3和Vimentin蛋白表达水平较对照组表达升高，E-cadherin表达降低(P<0.05)。HNE刺激鼻黏膜上皮细胞可导致其NLRP3和Vimentin的mRNA和蛋白表达水平均增加，E-cadherin表达降低。(2)刺激鼻黏膜上皮细胞的HNE为50 ng/mL时效果最为显著(P<0.05);用50 ng/mL的HNE刺激鼻黏膜上皮细胞，HNE作用时长为36 h时效果最为显著(P<0.05)。(3)MCC950预处理鼻黏膜上皮细胞，再用HNE刺激，NLRP3抑制剂预处理组E-cadherin的mRNA和蛋白表达水平升高，Vimentin, NLRP3的mRNA和蛋白表达水平降低(P<0.05)。结论:在CRSwNP中，HNE通过激活NLRP3促进人鼻黏膜上皮细胞发生上皮间质转化。
关键词：人嗜中性粒细胞弹性蛋白酶;;上皮间质转化;;慢性鼻窦炎伴鼻息肉;;NLRP3
基金资助：国家地区自然科学基金项目(No:82260217)
