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分析化学2025年第07期:双体积液滴对数字液滴PCR定量检测能力提升的研究

来源:期刊VIP网 时间:


作者:李姗姗;曹云亮;赵雪毅;李军委;

单位:河北工业大学机械工程学院;河北省机器人传感与人机融合重点实验室;电工装备可靠性与智能化国家重点实验室;河北工业大学生命科学与健康工程学院生物物理研究所;河北省分子生物物理重点实验室;

摘要:数字聚合酶链式反应(Digital polymerase chain reaction, dPCR)具备对核酸样本绝对定量检测的能力,由于其可检测样本的定量检测上限和下限主要取决于单个液滴的体积和数量,因此待测样本的丰度、单个液滴的体积和液滴数量需适配。对于未知丰度的样本,不允许反复调整液滴尺寸。本研究提出了一种一步法双体积液滴生成方法,研制了双体积液滴微流控芯片,以鸭源性试剂盒验证了此芯片的定量检测能力。结果表明,大体积液滴在检测低浓度样本时可靠性较高;小体积液滴在检测高浓度样本时具有优势。本研究提出的双体积液滴微流控芯片能产生不同体积的两个液滴,极大地提高了定量检测的可靠性,在未知丰度珍贵核酸样本的检测领域具有广阔的应用前景。

关键词:双体积液滴;;数字聚合酶链式反应;;绝对定量;;动态检测范围

基金资助:国家自然科学基金项目(No.52475590);; 天津市科技支撑重点项目(No.23YFZCSN00370);; 河北省自然科学基金项目(No.F2023202049);; 河北省省级科技计划项目(No.22567601H)资助~~