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分析化学2025年第11期:基于碳酸钙纳米立方体的光电双模式改良型酶联免疫吸附测定方法的研究

来源:期刊VIP网 时间:


作者:崔焕明;毛敏;毛勋;

单位:中南林业科技大学化学与化工学院;汨罗市人民医院;

摘要:通过气体扩散法可控制备了碳酸钙纳米立方体(CCNC),并以此为基础构建了一种改良型酶联免疫吸附测定(ELISA)方法,用于肺癌潜在生物标志物铁蛋白的光电双模式检测。本方法采用经典的夹心免疫分析模式,在酶标孔和CCNC中均修饰了铁蛋白的单克隆抗体,当样品溶液中含有铁蛋白时,通过夹心免疫反应,CCNC被捕获到酶标孔表面。加入HCl使CCNC释放出Ca~(2+),与加入的显色剂形成有色配合物,溶液颜色从淡黄色变为红色,采用酶标仪检测各孔在512 nm处的吸光度可以定量检测铁蛋白。在最佳条件下,铁蛋白浓度的对数值在1~250 ng/mL范围内与吸光度呈良好的线性关系,检出限(S/N>3)为0.6 ng/mL,与传统ELISA方法的检测结果相当。针对显色分析法灵敏度不高的问题,进一步引入了基于纳米金修饰电极的电化学分析方法,在优化的条件下,对铁蛋白的线性检测范围为0.05~100 ng/mL,检出限(S/N >3)为32 pg/mL。与常规的ELISA分析中采用的天然酶标记探针相比,本研究采用的CCNC探针制备简单、稳定性好、成本低,具有独特优势,为ELISA分析技术提供了新的选择。

关键词:碳酸钙纳米立方体;;显色法;;电化学免疫测定法;;人铁蛋白;;肺癌

基金资助:中南林业科技大学人才引进项目(No.2017YJ037)资助~~