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作者：王思亚;张蕾;张立涛;任强;张运涛;
单位：山东第一医科大学药学院(药物研究所);济宁医学院药学院;济宁医学院生物科学学院;
摘要：建立了一种柱前衍生-高效液相色谱-荧光检测法测定胰腺癌PANC-1、 CFPAC-1细胞荷瘤小鼠中7种硫酸软骨素（CS）二糖含量的方法。胰腺肿瘤样本经匀浆、脱脂、蛋白酶酶解、硫酸软骨素酶酶解等前处理得到CS二糖，以2-氨基吖啶酮（AMAC）为衍生剂，通过XBridge Shield RP18色谱柱分离。结果表明，在优化的色谱分离条件下，7种CS二糖标准品在各自的质量浓度范围内线性关系良好（R~2>0.99），检出限为0.01～0.08??g/mL，定量限为0.025～0.2??g/mL，相对标准偏差（RSD）为0.50%～1.4%，日内稳定性RSD为0.01%～0.09%，日间稳定性RSD为0.09%～0.21%。生物样本结果表明，肿瘤组织中的CS二糖含量均高于胰腺正常组织，并且PANC-1和CFPAC-1细胞荷瘤小鼠肿瘤组织中，??UA, 2S-GalNAc占比最高，分别为2043.42 nmol/g和762.89 nmol/g，??UA-GalNAc, 4S, 6S和??UA-GalNAc占比次之。??UA-GalNAc，??UA, 2S-GalNAc，??UA-GalNAc, 4S, 6S与表皮生长因子受体（EGFR）分子对接结合能分别为-6.6，-6.4，-6.1 kcal/mol，绝对值大小依次为无硫酸化??UA-GalNAc>单硫酸化??UA, 2S-GalNAc>二硫酸化??UAGalNAc, 4S, 6S。CS与EGFR结合能力的强弱与CS硫酸基团位点及数量有关，因此推测胰腺癌的发生、发展与CS的硫酸酯化模式有关；胰腺肿瘤组织中CS二糖硫酸基团取代越少，越影响胰腺癌的发生与发展，这为评估CS的硫酸酯化模式是否可以作为早期生物标志物提供了一定的参考价值，为胰腺癌的早期治疗和诊断提供了帮助。
关键词：胰腺癌;;硫酸软骨素;;高效液相色谱-荧光检测法;;含量测定
基金资助：山东省自然科学面上项目(ZR2022MH176)资助
