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作者：张攀松;贺芳芳;常新;任晨霞;
单位：长治医学院老年健康研究中心;长治医学院中心实验室;
摘要：8-氧鸟嘌呤DNA糖基化酶（OGG1）在碱基切除修复系统中起关键作用，能够特异性修复由8-氧鸟嘌呤引起的DNA损伤。通过生物信息学分析发现，OGG1在肾嫌色细胞癌（KICH）和子宫内膜癌（UCEC）中的表达显著降低。因此，开发直接、特异且快速的OGG1检测方法及其抑制剂筛选手段，将有助于早期临床诊断，并为评估细胞内氧化应激和DNA损伤提供重要工具。该研究利用G四链体能够与硫磺素T(ThT)特异性结合并发出荧光的特性，开发了一种简单、快速且无标记的OGG1及其抑制剂检测方法。该研究设计了一段可形成G四链体的DNA序列，并在其环状区域引入8-氧鸟嘌呤（8-oxo-dG），命名为8-oxo-G4。当体系中加入OGG1时，该酶会识别并水解8-oxo-dG，形成脱嘌呤位点；经过95℃5 min处理后，该位点破裂，导致序列无法形成G四链体结构，从而不能与ThT结合，荧光信号不增强。相反，若体系中不含OGG1，则DNA正常形成G四链体并与ThT特异性结合，产生强烈荧光。使用该方法检测OGG1及其抑制剂（如SU0268）的操作过程不超过2 h。此研究提供了一种简便快捷的OGG1及其抑制剂检测手段，为癌症早期诊断及细胞内氧化应激和DNA损伤的评估提供了新思路。
关键词：8-氧鸟嘌呤DNA糖基化酶;;G四链体;;荧光;;检测
基金资助：山西省基础研究计划(202403021212062,202203021222314);; 山西省高等学校科技创新计划(2023L203)资助
