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作者：耿燕华;邱鑫晨;何云飞;李姗姗;
单位：河北工业大学机械工程学院;国家知识产权局专利局专利审查协作天津中心;河北工业大学亚利桑那工业学院;
摘要：本研究建立了一种在微流控芯片上同时鉴别婴儿奶粉中常见的4种食源性致病菌大肠杆菌O157:H7、沙门氏菌、单增李斯特菌、金黄色葡萄球菌的多重数字聚合酶链反应（PCR）检测方法。根据这些致病菌在GenBank上公布的保守基因序列，设计并合成了该4种致病菌的引物。这些引物具有对上述菌株的特异性和保守性。用不同波长的荧光作为探针标记，可使用对波长敏感的光学传感器识别不同的菌种。选择人工混样的含致病菌奶粉样本和盲测样本，将自主开发的数字微腔芯片检测结果和商用流式数字液滴PCR仪进行对比，验证了该方法的多重检测能力、检测准确性和定量检测能力。结果显示，该方法可在短时间内同时对上述4种致病菌进行原位扩增和检测，且检测灵敏度低至3 copies/??L，为婴儿奶粉中致病菌高通量快速有效检测提供支持。
关键词：生物芯片;;快速检测;;多重数字PCR;;致病菌;;奶粉安全
基金资助：国家自然科学基金(52475590);; 天津市科技支撑重点项目(23YFZCSN00370);; 河北省自然科学基金杰青项目(F2023202049)资助
