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作者：杨越;张解玉;张馨文;魏光成;石金杰;李晓旭;赵珈禾;曹炜;
单位：中国中医科学院望京医院;
摘要：目的 基于组蛋白H3的赖氨酸18位乳酸化修饰（H3K18la）与Janus激酶2/信号转导和转录激活子3(JAK2/STAT3)信号通路探讨清热活血方治疗类风湿关节炎可能的作用机制。方法 24只雄性SD大鼠随机分为对照组、模型组、清热活血方组、甲氨蝶呤组，每组6只。除对照组外，其余各组大鼠采用牛Ⅱ型胶原与弗氏不完全佐剂混合制成乳化剂，建立胶原诱导性关节炎大鼠模型。自造模第1天开始，清热活血方组以20 g/（kg·d）清热活血方灌胃，每日1次；甲氨蝶呤组予每周1 mg/kg甲氨蝶呤混悬液灌胃，分别于每周二、四灌胃；对照组、模型组每日以及甲氨蝶呤组非灌胃日均以10 ml/（kg·d）灌胃生理盐水，每日1次。各组均连续灌胃4周。各组分别于第2次免疫后第6、10、14、18、22天进行关节炎指数评分；最后一次灌胃后次日取材，HE染色法检测膝关节滑膜及踝关节病理变化；ELISA法检测大鼠血清中C反应蛋白（CRP）、白细胞介素17(IL-17)水平；微量法检测滑膜中乳酸水平；免疫共沉淀法获取大鼠膝关节滑膜组织中乳酸化蛋白后Western Blot法检测滑膜中H3K18la的水平；Western Blot法检测踝关节磷酸化Janus激酶2(P-JAK2)、磷酸化信号转导和转录激活子3(P-STAT3)蛋白表达水平。结果 病理结果显示，对照组大鼠滑膜细胞排列整齐，形态正常，无血管增生情况。模型组大鼠滑膜细胞排列杂乱，结构异常，有血管增生与大量炎性细胞浸润；与对照组比较，关节炎指数评分、CRP、IL-17水平显著增高，滑膜中乳酸、H3K18la及关节中P-JAK2、P-STAT3蛋白水平均明显增高（P<0.01）。与模型组比较，清热活血方组及甲氨蝶呤组大鼠滑膜与关节病理显示炎性损伤减轻，关节炎指数评分、CRP、IL-17水平显著降低，乳酸、H3K18la及P-JAK2、P-STAT3蛋白水平均明显降低（P<0.05或P<0.01）。与甲氨蝶呤组比较，清热活血方组在大鼠膝关节及踝关节病理改变相似，以上各指标两组比较差异无显著统计学意义（P>0.05）。结论 清热活血方可能通过调节乳酸含量下调H3K18la水平，同时抑制JAK2/STAT3信号通路从而改善胶原诱导性关节炎模型大鼠炎症。
关键词：类风湿关节炎;;胶原诱导性关节炎;;清热活血方;;乳酸;;Janus激酶2;;信号转导和转录激活子3
基金资助：北京市自然科学基金(7242261);; 中国中医科学院望京医院高水平中医医院建设项目(WJCC-202317,WJCC-202321)
