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作者:胡雨菡;张佩琪;汪艳;李丕顺;郑晓峰;
单位:湖南农业大学动物医学院;惠州职业工程学院;
摘要:T-2毒素是常见的霉菌毒素之一,可损害畜禽的生殖能力,而中草药菟丝子对雄性生殖系统损伤具有一定的保护作用,可作为研究T-2毒素诱导生殖损伤治疗药物的新方向。本试验建立了T-2毒素诱导的小鼠睾丸间质细胞(TM3)损伤模型,评价菟丝子提取物(SCE)对T-2毒素诱导的TM3细胞损伤的保护作用。采用Annexin V-FITC/PI双染法检测细胞凋亡水平,JC-1染色法检测线粒体膜电位变化,实时荧光定量聚合酶链式反应(qPCR)和蛋白免疫印迹法(WB)分别检测促凋亡基因、抗凋亡基因以及凋亡标志基因的mRNA和蛋白表达量。结果显示,与对照组(CON组)相比,T-2组(10 nmol/L T-2毒素)细胞凋亡率极显著增加(P<0.01),线粒体膜电位显著降低(P<0.05),Bad、Bax、Bak1、Bcl2、Bid、Casp3、Casp9和Trp53基因相对表达量极显著提高(P<0.01),Caspase-3剪切体蛋白相对表达量极显著增加(P<0.01),BCL-2/BAX蛋白相对表达量显著降低(P<0.05)。与T-2组相比,SCE+T-2组(0.1 mg/mL SCE和10 nmol/L T-2毒素)细胞凋亡率极显著降低(P<0.01),线粒体膜电位显著升高(P<0.05),Casp9、Casp3和Trp53基因相对表达量极显著降低(P<0.01),Bcl2基因相对表达量极显著提高(P<0.01),Caspase-3剪切体蛋白相对表达量显著降低(P<0.05)。结果表明,SCE可以抑制线粒体凋亡途径相关基因和蛋白表达,从而抑制T-2毒素诱导的细胞凋亡,本试验结果可为今后开发用于缓解T-2毒素诱导的雄性生殖系统损伤的治疗药物提供新的参考依据。
关键词:菟丝子;;小鼠睾丸间质细胞;;T-2毒素;;细胞凋亡
基金资助:2023年“芙蓉计划”湖南省普通高等学校科技创新团队支持项目资助(2050205)