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作者：董俊丽;郭鑫;倪洋;李婧娴;岳宇坤;刘焕奇;陈永平;
单位：青岛农业大学动物医学院;
摘要：为了探究番茄红素（LYC）对金黄色葡萄球菌（S. aureus）诱导小鼠乳腺炎的保护作用及其机制，本试验选取6～8周龄昆明妊娠母鼠36只，随机均分为6个组：对照组、LYC组、模型组、低剂量组、中剂量组和高剂量组。从母鼠配种中期（即母鼠见栓后第7天）开始，LYC组、低剂量组、中剂量组和高剂量组每天分别灌胃给予50、12.5、25和50 mg/（kg·bw） LYC，对照组和模型组灌胃同体积的玉米油，连续灌胃28 d后，于乳腺导管注射S. aureus悬液（2×10~8 CFU/mL）建立小鼠乳腺炎模型（对照组和LYC组不做处理）。24 h后处死小鼠，观察小鼠乳腺组织解剖学变化；摘取第4对乳腺组织，苏木精-伊红（H. E.）染色观察乳腺组织病理学变化；酶联免疫吸附试验（ELISA）检测小鼠乳腺组织炎症因子[肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-1β(IL-1β)]浓度；蛋白免疫印迹（WB）检测紧密连接蛋白[闭合小环蛋白1(ZO-1)、闭合蛋白（Occludin）、紧密连接蛋白-3(Claudin-3)]表达。进一步通过微量肉汤法检测LYC对S. aureus的最小抑菌浓度（MIC），绘制S. aureus生长曲线；溶血法检测S. aureus溶血活性；WB检测S. aureus的α-溶血素（Hla）表达。结果显示，与对照组相比，模型组小鼠乳腺组织出血，乳腺腺泡壁固有结构受到破坏、乳腺腺泡壁增厚、炎性细胞浸润，乳腺组织损伤评分极显著升高（P<0.01），炎症因子（TNF-α、IL-1β和IL-6）浓度极显著升高（P<0.01），紧密连接蛋白（ZO-1、Occludin、Claudin-3）表达量极显著降低（P<0.01）。低、中、高剂量组均显著地逆转了S. aureus诱导的上述指标的变化（P<0.05或P<0.01）。与对照组相比，LYC组所有指标均无显著差异（P > 0.05）。LYC对S. aureus的MIC为128??g/mL；亚抑菌浓度（16、32、64??g/mL）LYC极显著抑制S. aureus溶血活性（P<0.01），并呈剂量依赖性地降低Hla蛋白表达（P<0.01）；而8??g/mL LYC对S. aureus溶血活性和Hla蛋白表达均无显著影响（P > 0.05）。结果表明，LYC通过调控宿主炎症反应和细菌毒力以缓解S. aureus诱导的乳腺炎，为天然产物靶向“宿主-病原体”互作而防控乳腺炎提供了新策略。
关键词：番茄红素;;金黄色葡萄球菌(S. aureus);;乳腺炎;;α-溶血素;;细菌毒力
基金资助：山东省自然科学基金青年项目（ZR2024QC003）;; 山东省现代农业产业技术体系牛产业创新团队资助项目（SDAIT-09-05）
