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作者：曲诗音;赵欣宇;汪艳;李丕顺;郑晓峰;
单位：湖南农业大学动物医学院;
摘要：为了探究表观抑制剂伏利若他（VOR）对猪流行性腹泻病毒（PEDV）的抑制效果及其作用机制，本试验构建PEDV感染的非洲绿猴肾细胞（Vero）模型，采用CCK-8法确定VOR的安全浓度，通过实时荧光定量逆转录聚合酶链反应（RTqPCR）、蛋白免疫印迹（WB）和间接免疫荧光试验（IFA）检测病毒基因和蛋白表达，结合病毒生命周期阶段试验（吸附、侵入、复制和释放）及宿主免疫相关基因表达分析，综合评价VOR的抗病毒作用。结果显示，与病毒对照组（PEDV+DMSO）相比，VOR处理组（安全浓度1??mol/L）在感染后24 h时，PEDV开放阅读框3(ORF3)基因mRNA(P<0.05)和核衣壳（N）蛋白（P<0.001）表达显著降低，病毒感染效率极其显著降低（P<0.001）。进一步分析显示，VOR对PEDV的吸附和释放阶段无显著影响（P > 0.05），但极显著抑制病毒侵入（P<0.01）和复制阶段（P<0.000 1）ORF3基因mRNA表达量。在免疫调控方面，VOR处理24 h可极显著上调干扰素刺激基因15(ISG15)mRNA表达量（P<0.01），同时极显著下调髓系细胞核分化抗原1(MX-1)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)和白细胞介素6(IL-6)mRNA表达量（P<0.01或P<0.001）。本试验首次证实VOR对PEDV的抑制作用，并揭示其通过调控宿主免疫从而影响病毒侵入和复制阶段的抗病毒机制，为开发新型抗PEDV药物提供了理论依据。
关键词：伏利若他;;猪流行性腹泻病毒(PEDV);;抗病毒;;宿主免疫
基金资助：2023年“芙蓉计划”——湖南省普通高校科技创新团队项目（2050205）
