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作者：孟卫芹;董林;宋晶晶;魏凤;付强;王长江;郭时金;王金良;
单位：山东省滨州畜牧兽医研究院;
摘要：为建立一种快速检测羊血清中布鲁氏菌抗体的免疫层析方法，本试验以荧光微球作为标记物偶联布鲁氏菌重组外膜蛋白BP26，将BP26蛋白及其单克隆抗体1D10分别喷涂于硝酸纤维素膜的检测线和质控线，优化反应条件组装荧光微球试纸条，并评价其特异性、敏感性和重复性；将该方法对184份临床羊血清样品的检测结果与布鲁氏菌竞争酶联免疫吸附试验（cELISA）抗体检测试剂盒的检测结果进行对比。结果显示，荧光微球偶联物的最佳复溶倍数为200倍，检测线最佳包被浓度为0.6 mg/mL，最佳反应时间为15 min；该试纸条与曼氏杆菌、沙门菌、小肠耶尔森菌、小反刍兽疫病毒和口蹄疫病毒阳性血清均无交叉反应；检测布鲁氏菌阳性血清标准品的最大稀释度为1∶800；批内和批间变异系数均小于10%；使用该试纸条检测临床样品的结果与布鲁氏菌cELISA试剂盒检测结果的总体符合率为92.4%。结果表明，本试验所制备的布鲁氏菌荧光微球免疫层析试纸条特异性强、灵敏度高、快速稳定、结果准确且成本低，可用于布鲁氏菌抗体临床快速筛查和流行病学调查。
关键词：布鲁氏菌;;抗体;;BP26;;荧光微球
基金资助：山东省羊产业技术体系岗位专家资助项目（SDAIT-10-06）
