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作者:吕志远;李欣;罗雅洁;刘丹;张紫彤;赵智香;韩燕茹;王金玲;呼和巴特尔;特木热;刘瑞军;王文龙;高娃;
单位:内蒙古农业大学兽医学院;河套学院农学系内蒙古自治区虫媒人兽共患传染病重点实验室;巴彦淖尔市动物疫病预防控制中心;巴彦淖尔市临河区动物疫病预防控制中心;
摘要:为分离鉴定内蒙古地区的山羊支原体山羊肺炎亚种(Mccp)并提高Mccp在液体培养基中的生长浓度,本试验对内蒙古巴彦淖尔及周边地区的43份疑似山羊传染性胸膜肺炎(CCPP)样品进行分离培养和形态学观察;通过基因扩增和序列分析将待测支原体分离株鉴定至亚种水平;通过颜色改变单位(CCU)法和聚合酶链式反应(PCR),基于初始pH和培养基成分的调整,获得有效提高Mccp生长浓度的条件。结果显示,分离、纯化获得5株单菌落,光学显微镜下观察菌落形态呈典型的乳头状;基因扩增和序列分析结果显示,内蒙古巴彦淖尔及周边地区引起山羊支原体肺炎的主要病原为Mccp,该分离株与甘肃的M1601 Mccp分离株以及肯尼亚的F38、ILRI181 Mccp分离株同源性为100%;与世界动物卫生组织(WOAH)改良的CCPP液体培养基(pH 7.6,含醋酸铊)相比,CCPP液体培养基初始pH为8.4且不含醋酸铊时,Mccp生长浓度显著升高(P<0.05),分离株生长浓度最高可以达到10~(11) CCU/mL,并且Mccp的接种成功率提高20.93%。结果表明,本试验成功分离到5株Mccp,并且在CCPP液体培养基初始pH为8.4且不含醋酸铊的条件下,Mccp生长浓度显著提高(P<0.05),峰值达10~(11) CCU/mL,接种成功率也同步提升,为Mccp的分离鉴定以及提高其生长浓度提供更坚实的科学依据。
关键词:山羊支原体山羊肺炎亚种;;分离培养;;pH;;醋酸铊
基金资助:国家自然科学基金项目(32360051);; 中央引导地方科技发展资金项目(2022ZY0219)