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作者：栾曼茹;朱肖亭;闵佳;张子敬;施巧婷;鲁立刚;刘洪瑜;闫祥洲;王二耀;吕世杰;
单位：河南省农业科学院畜牧研究所;河南农业大学动物科技学院;毕节市农业科学院;安徽农业大学动物科技学院;神农种业实验室;
摘要：本研究通过分析超数排卵后牛子宫液外泌体中的miRNA表达差异，旨在探究其在早期妊娠中的作用，筛选与牛胚胎发育和着床相关的miRNA。本试验以皖东青年母牛为研究对象，开展了同期发情、超数排卵及人工授精。人工授精后第7天，冲洗子宫以获取胚胎及冲洗液。以国际胚胎生产平均水平5.5枚为标准，选取可用胚胎数量大于5.5枚的3头牛作为试验组，无可用胚胎的3头牛作为对照组。通过超速离心法从子宫冲洗液中提取外泌体，并使用透射电镜进行鉴定。提取外泌体中的miRNA并检测其表达水平，分析具有显著差异的miRNA。通过靶基因预测和分析，筛选和鉴定与胚胎发育和着床相关的miRNA。透射电镜结果显示，被检测样本呈茶托型，符合外泌体特征。与对照组相比，试验组中有5个miRNA显著上调、10个显著下调（P<0.05）。差异最显著的已知miRNA为bta-miR-1(P=0.001)。从15个差异表达的miRNA预测出2 903个无重复的靶基因。KEGG分析结果表明，这些靶基因主要富集在MAPK、Rap1和黏着斑（Focal adhesion）等通路上，提示子宫液外泌体miRNA可能调控胚胎发育和着床。在牛子宫内膜上皮细胞中，bta-miR-1的过表达抑制了IGF1基因mRNA和蛋白质水平的表达，表明bta-miR-1与IGF1基因可能存在靶向关系。本研究结果可为筛选与胚胎发育和着床相关的子宫液外泌体miRNA提供参考，并为解析其在早期妊娠中的调控机制奠定基础。
关键词：牛;;外泌体;;miRNA;;差异表达;;妊娠
基金资助：国家肉牛牦牛产业技术体系（CARS-37）;; 河南省肉牛产业技术体系项目（HARS-22-13-S）;; 河南省科技攻关（252102110073）;; 河南省自然基金项目（252300420687）;; 河南省农业科学院自主创新项目（2025ZC66）;河南省农业科学院自主创新项目（2025ZC67）;河南省农业科学院科技创新团队项目（2024TD25）;; 河南省牛产业科技特派员服务团（泌阳）;; 神农种业实验室协同创新项目（SN02-2025-02）
