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作者：李亦君;夏琳;杨小贝;王中;谢小东;杨军;宁黔冀;武明珠;
单位：中国烟草总公司郑州烟草研究院;河南师范大学生命科学学院;
摘要：羟肉桂酰辅酶A奎宁酸羟肉桂酰转移酶（hydroxycinnamoyl-CoA quinate hydroxycinnamoyl transferase,HQT）是绿原酸合成代谢通路的关键酶。从普通烟草（Nicotiana tabacum L.）中克隆到1个NtHQT的同源基因，并命名为NtHQT2。氨基酸序列比对和遗传进化分析结果显示，NtHQT2具有HQT蛋白保守的HTLSD和DEFEG基序，并且在进化上与烟草及其他茄科植物HQT属于同1个分支。通过qRT-PCR分析NtHQT2基因在烟草不同组织的表达模式发现，NtHQT2基因在烟草根、茎、叶、腋芽和花中均有表达，但在叶片中的表达量较高。进一步利用CRISPR/Cas9基因编辑技术对NtHQT2基因进行定向敲除，获得了3种类型的T0代基因编辑植株，均能导致NtHQT2蛋白的翻译错误。通过测定T2代NtHQT2基因编辑烟株叶片中绿原酸含量，发现编辑烟株比对照K326烟株绿原酸含量显著下降，说明NtHQT2基因正向调控绿原酸的合成。
关键词：烟草;NtHQT2基因;绿原酸;CRISPR/Cas9;基因编辑
基金资助：河南省重点研发与推广专项（科技攻关）项目“光照调控烟草绿原酸合成关键基因NtHQT2分子机制研究”（222102110164）
