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畜牧与兽医2025年第03期:稳定表达绿色荧光蛋白的盖塔病毒的构建与鉴定

来源:期刊VIP网 时间:


作者:姜智文;秦颖;陈杰;粟硕;

单位:南京农业大学三亚研究院;

摘要:为了开发表达外源基因的重组盖塔病毒,通过反向遗传技术,在盖塔病毒nsP3基因的C端插入绿色荧光蛋白ZsGreen,并通过转染至BHK-21细胞拯救重组病毒并研究其生长特性。结果:感染性cDNA克隆pSM-GETV-nsP3/ZsGreen转染BHK-21细胞后表达绿色荧光蛋白,所拯救的报告病毒可以在BHK-21细胞上稳定传代(至少10代),并表现出良好的遗传稳定性;多步生长曲线试验表明,报告病毒GETV-ZsGreen在BHK-21细胞上的增殖能力略低于亲本毒株,但仍能达到较高病毒滴度。综上,本研究构建并拯救了1株遗传稳定的GETV报告病毒GETV-ZsGreen。

关键词:盖塔病毒;感染性克隆;报告病毒

基金资助:三亚崖州湾科技城科技专项资助项目(SCKJ-JYRC-2022-08)